U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP е генетично модифицирана клетъчна линия на остеосарком, получена от изходната човешка клетъчна линия U-2 OS. Тази клетъчна линия е създадена чрез CRISPR/Cas9-медиирано редактиране на генома, за да се включи SNAP-таг в гена NUP96, което позволява визуализиране и изследване на динамиката на ядрения порен комплекс. Комплексите на ядрените пори (NPC) са от решаващо значение за регулирането на нуклеоцитоплазмения транспорт, а NUP96 е важен компонент на NPC, който играе ключова роля за структурната цялост и функцията му.

В клонинг № 33 на U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP интегрирането на SNAP-таг в локуса на NUP96 позволява специфично и ковалентно прикрепване на флуоресцентни субстрати или други химически сонди, които могат да се използват за изобразяване на живи клетки и други биохимични анализи. Тази характеристика го прави безценен инструмент за изследване на молекулярната динамика на нуклеоцитоплазмения транспорт, за разбиране на патологиите, свързани с NPC, и за скрининг на терапевтични съединения, които влияят на функцията на NPC. Клетъчната линия също така запазва характеристиките на родителската линия U-2 OS, които включват високо ниво на генетична стабилност и лесно култивиране, което я прави подходяща за високопроизводителен скрининг и разширени изследвания в областта на клетъчната биология.

Благодарение на специфичността на модификацията в гена NUP96, U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP клонинг № 33 предоставя уникален модел за подробно изследване на компонентите на NPC в контекста на клетъчната функция и дисфункция. Изследователите могат да използват системата за SNAP-етикетиране за селективно и бързо маркиране на NUP96, което улеснява визуализирането на динамиката на NPC в реално време при физиологични и патологични условия. Този специфичен клонинг може да служи като стабилна платформа както за фундаментални изследвания, така и за приложни биомедицински проучвания, допринасяйки значително за областите на клетъчната биология, генетиката и онкологията.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация