U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP on geneetiliselt muundatud osteosarkoomi rakuliin, mis on saadud inimese U-2 OS vanemrakuliinist. See rakuliin on muudetud CRISPR/Cas9-vahendatud genoomi redigeerimise abil, et lisada SNAP-märgis NUP96 geenile, mis võimaldab tuumapoorikompleksi dünaamika visualiseerimist ja uurimist. Tuumapoorikompleksid (NPC) on tuumasütoplasma transpordi reguleerimisel üliolulised ja NUP96 on NPC oluline komponent, millel on keskne roll selle struktuurilises terviklikkuses ja funktsioonis.

U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP kloonis nr 33 võimaldab SNAP-tähe integreerimine NUP96 lokaali spetsiifilist ja kovalentset kinnitamist fluorestseeruvate substraatide või muude keemiliste proovide jaoks, mida saab kasutada elusraku kujutamiseks ja muude biokeemiliste analüüside tegemiseks. See omadus muudab selle hindamatuks vahendiks nukleotsütoplasma transpordi molekulaarse dünaamika uurimiseks, NPCga seotud patoloogiate mõistmiseks ja NPC funktsiooni mõjutavate terapeutiliste ühendite skriininguks. Rakuliin säilitab ka vanemliini U-2 OS omadused, mille hulka kuuluvad kõrge geneetiline stabiilsus ja lihtne kasvatamine, mistõttu sobib see rakuliin kõrge läbilaskevõimega skriininguks ja ulatuslikeks uuringuteks rakubioloogias.

Tänu modifikatsiooni spetsiifilisusele NUP96 geenis pakub U-2 OS-CRISPR-NUP96-SNAP kloon nr 33 ainulaadset mudelit NPC komponentide üksikasjalikuks uurimiseks raku toimimise ja talitlushäirete kontekstis. Teadlased saavad kasutada SNAP-märgise süsteemi NUP96 selektiivseks ja kiireks märgistamiseks, hõlbustades NPC dünaamika visualiseerimist reaalajas füsioloogilistes ja patoloogilistes tingimustes. See konkreetne kloon võib olla tugev platvorm nii alusuuringute kui ka rakenduslike biomeditsiiniliste uuringute jaoks, aidates oluliselt kaasa rakubioloogia, geneetika ja onkoloogia valdkondadele.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest