U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple on geneetiliselt muundatud osteosarkoomi rakuliin, mis on saadud inimese U-2 OS rakuliinist, mis on tuntud oma tugevate kasvuomaduste ja kasulikkuse poolest erinevates bioloogilistes uuringutes. Seda konkreetset klooni on muudetud CRISPR/Cas9 geenitöötlustehnoloogia abil, et lisada NUP96 geenile mMaple, mis on fotokonverteeritav fluorestseeruv valk. Valk mMaple võimaldab kasutada täiustatud pildistamismeetodeid, nagu elusraku pildistamine ja superresolutsioonimikroskopeerimine, andes dünaamilise ülevaate tuumapoorikompleksi (NPC) käitumisest ja raku impordi-ekspordimehhanismidest läbi tuumakesta.

NUP96 geen, mis kodeerib NPC olulist komponenti, on oluline nukleotsütoplasma transpordiks. NUP96 muutmine võib mõjutada mitte ainult transpordimehhanisme, vaid ka üldist tuumaarhitektuuri ja -funktsiooni. Seega on see rakuliin suurepärane mudel NPCga seotud patoloogiate ja tuuma transpordi rolli uurimiseks raku metabolismis ja signaalimisel. MMaple integreerimine NUP96-sse võimaldab NUP96 dünaamika reaalajas jälgimist ja visualiseerimist in vivo, muutes selle asendamatuks vahendiks rakutuuma uuringutele keskendunud teadlastele ja neile, kes uurivad NPC düsfunktsioonide mõju sellistes haigustes nagu vähk ja viirusinfektsioonid.

Spetsiaalse vahendina toetab U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple kloon nr.16 kõrge eraldusvõimega pildistamist ja annab olulisi andmeid NPC komponentide ruumilise ja ajalise jaotumise kohta. See on eriti väärtuslik katsete jaoks, mis nõuavad geeniekspressiooni, valkude lokaliseerimise ja tuuma transpordi üksikasjalikku analüüsi füsioloogilistes ja patoloogilistes tingimustes, hõlbustades rakuliste protsesside sügavamat mõistmist molekulaarsel tasandil.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest