U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple er en genmodifisert osteosarkomcellelinje avledet fra den humane U-2 OS-cellelinjen, som er kjent for sine robuste vekstegenskaper og anvendelighet i ulike biologiske studier. Denne klonen har blitt modifisert ved hjelp av CRISPR/Cas9-genredigeringsteknologi for å inkorporere mMaple, et fotokonverterbart fluorescerende protein, i NUP96-genet. MMaple-proteinet gjør det mulig å bruke avanserte avbildningsteknikker som levende celleavbildning og superoppløsningsmikroskopi, noe som gir dynamisk innsikt i atferden til kjerneporkomplekset (NPC) og cellulære import- og eksportmekanismer gjennom kjerneskjoldet.

NUP96-genet, som koder for en viktig komponent i NPC, er avgjørende for nukleocytoplasmatisk transport. Endringer i NUP96 kan ikke bare påvirke transportmekanismene, men også den generelle kjernearkitekturen og -funksjonen. Denne cellelinjen er derfor en utmerket modell for å studere NPC-relaterte patologier og kjernetransportens rolle i cellulær metabolisme og signalering. Integrasjonen av mMaple i NUP96 gjør det mulig å spore og visualisere NUP96-dynamikken in vivo i sanntid, noe som gjør den til et uunnværlig verktøy for forskere som fokuserer på studier av cellekjerner, og for dem som utforsker konsekvensene av NPC-dysfunksjoner i sykdommer som kreft og virusinfeksjoner.

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple klon nr. 16 er et spesialisert verktøy som støtter høyoppløselig avbildning og gir omfattende data om den romlige og tidsmessige fordelingen av NPC-komponenter. Det er spesielt verdifullt for eksperimenter som krever detaljert analyse av genuttrykk, proteinlokalisering og nukleær transport under fysiologiske og patologiske forhold, noe som bidrar til en dypere forståelse av cellulære prosesser på molekylært nivå.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring