U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple

U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple הוא קו תאים של אוסטאוסרקומה מהונדס גנטית, שמקורו בקו התאים האנושי U-2 OS, הידוע במאפייני הצמיחה החזקים שלו ובשימושיותו במחקרים ביולוגיים שונים. שיבוט זה עבר שינוי באמצעות טכנולוגיית עריכת גנים CRISPR/Cas9 כדי לשלב את mMaple, חלבון פלואורסצנטי המומר באור, בגן NUP96. חלבון mMaple מאפשר טכניקות הדמיה מתקדמות כגון הדמיה של תאים חיים ומיקרוסקופיה ברזולוציה גבוהה, ומספק תובנות דינמיות על התנהגות מורכבות הנקבוביות הגרעיניות (NPC) ומנגנוני הייבוא והייצוא התאיים דרך מעטפת הגרעין.

הגן NUP96, המקודד מרכיב חיוני ב-NPC, הוא חיוני לתחבורה גרעינית-ציטופלזמית. שינוי ב-NUP96 יכול להשפיע לא רק על מנגנוני התחבורה, אלא גם על הארכיטקטורה והתפקוד הכלליים של הגרעין. קו תאים זה משמש אפוא מודל מצוין לחקר פתולוגיות הקשורות ל-NPC ותפקידה של התחבורה הגרעינית במטבוליזם ובתקשורת התאית. שילוב mMaple ב-NUP96 מאפשר מעקב והדמיה בזמן אמת של הדינמיקה של NUP96 in vivo, מה שהופך אותו לכלי חיוני לחוקרים המתמקדים במחקרי גרעין התא ולחוקרים הבוחנים את ההשלכות של תפקוד לקוי של NPC במחלות כגון סרטן וזיהומים נגיפיים.

ככלי ייעודי, U-2 OS-CRISPR-NUP96-mMaple clone no.16 תומך בהדמיה ברזולוציה גבוהה ומספק נתונים משמעותיים לגבי התפלגות המרכיבים של NPC במרחב ובזמן. הוא בעל ערך רב במיוחד לניסויים הדורשים ניתוח מפורט של ביטוי גנים, לוקליזציה של חלבונים ותחבורה גרעינית בתנאים פיזיולוגיים ופתולוגיים, ומאפשר הבנה מעמיקה יותר של תהליכים תאיים ברמה המולקולרית.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו