U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo
Cell line · Číslo výrobku 300448
U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo je geneticky modifikovaná buněčná linie odvozená z buněk lidského osteosarkomu U-2 OS. Tato buněčná linie byla modifikována pomocí...
Přizpůsobení / Doporučení
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-HaloCell line€800.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo je geneticky upravená buněčná linie odvozená z buněk lidského osteosarkomu U-2 OS. Tato buněčná linie byla upravena pomocí technologie CRISPR-Cas9 tak, aby do lokusu genu NUP96 byla začleněna značka HaloTag. NUP96, součást komplexu jaderných pórů, hraje klíčovou roli v jaderném transportu a buněčné regulaci. Zavedení HaloTag umožňuje přesnou vizualizaci a biochemickou charakterizaci dynamiky a interakcí NUP96 v buňce.
Tím, že usnadňuje kovalentní připojení fluorescenčních ligandů nebo jiných sond, umožňuje HaloTag zobrazování v reálném čase a poskytuje výkonný nástroj pro studium mechanismů jaderného transportu v živých buňkách. Tento konkrétní klon s číslem 252 byl vybrán pro stabilní expresi NUP96 s označením HaloTag, což zajišťuje konzistentní výkon v experimentálních sestavách. Díky této vlastnosti je velmi vhodný pro zobrazovací techniky s vysokým rozlišením a studie molekulárních interakcí, čímž podporuje pokročilý výzkum v buněčné biologii, zejména v kontextu jaderné funkce a genetické regulace.
- Tkáň
- Kost
- Nemoc
- Osteosarkom
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-CRISPR-NUP96-Halo, clone 252) contains a CRISPR-edited NUP96-Halo fusion generated via lentiviral delivery, enabling fluorescent labeling of nuclear pore complexes. The modification is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Epitelu podobné
04Identifikátory
- Citace
- U-2 OS-CRISPR-NUP96-Halo (katalogové číslo Cytion 300448)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_B7FI
- Vkladatel
- Ellenbergova laboratoř (EMBL)
05Exprese a náchylnost
- Exprese proteinů
- NUP96-Halo (endogenní protein jaderného pórového komplexu 96, značený Halo)
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilní glutamin, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Hustota výsevu
- 1 x 104 buněk/cm2
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 15 let
- Etnická příslušnost
- Kavkazský
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Platí smlouvy s třetími stranami
- Ano
.jpg)


.jpg)
.jpg)

.jpg)
