Preskoči na vsebino
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107
Tkivo
Kosti
Bolezen
Osteosarkom

Dokumenti

U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

Cell line · Številka izdelka 300294

Celična linija U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 predstavlja specializirano različico široko uporabljane človeške celične linije osteosarkoma U-2 OS. Ta poseben model je bil...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 predstavlja specializirano različico pogosto uporabljene celične linije človeškega osteosarkoma U-2 OS. Ta poseben model je bil zasnovan tako, da izraža različico nukleoporina Nup107 z oznako SNAP, ki je ključna sestavina kompleksa jedrnih por in je bistvenega pomena za prenos molekul med jedrom in citoplazmo. Vključitev tehnologije SNAP-tag omogoča biortogonalno označevanje in vizualizacijo Nup107 v živih ali fiksiranih celicah, kar zagotavlja močno orodje za preučevanje nukleocitoplazmatskega transporta in arhitekture kompleksa jedrskih por v fizioloških pogojih.

Ozadje U-2 OS ima več prednosti, vključno z visoko stopnjo rasti in dobro opisanim kariotipom, ki podpirata visoko zmogljive presejalne aplikacije in genomske študije. Tehnologija ZFN (nukleaza s cinkovimi prsti), ki se uporablja v tej celični liniji, omogoča ciljno urejanje genoma, kar povečuje natančnost, s katero lahko raziskovalci raziskujejo genetski prispevek k jedrskemu transportu in drugim celičnim procesom. Ta celična linija je še posebej uporabna za študije, katerih cilj je pojasniti dinamiko in regulacijo kompleksov jedrskih por v biologiji raka in celični fiziologiji.

Zaradi specializirane narave celične linije U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 št. 294 je zelo primerna za napredne tehnike slikanja, vključno z mikroskopijo s superresolucijo, s katerimi je mogoče raziskati funkcije nukleoporinov v podrobnostih brez primere. Je tudi dragocen vir za razvoj terapevtskih strategij, usmerjenih na poti jedrskega transporta, ki so vpletene v različne bolezni, vključno z rakom. Komponenta SNAP-tag dodaja vsestranskost za nadaljnje biokemične in proteomske analize, zato je nepogrešljivo orodje na področju celične in molekularne biologije.

Tkivo
Kosti
Bolezen
Osteosarkom

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This human osteosarcoma cell line (U2OS-ZFN-SNAP-Nup107 no.294) contains a ZFN-mediated SNAP-Nup107 gene fusion, supporting selective labeling of the Nup107 nuclear pore subunit. The modification is stably present. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 (kataloška številka Cytion 300294)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B7FM
Vlagatelj
Laboratorij Ellenberg (EMBL)

04Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
SNAP-Nup107 (protein kompleksa jedrskih por 107, oznaka SNAP)

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glukoze, w: stabilen glutamin, w: 2,0 mM natrijevega piruvata, w: 2,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820200a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 3,0 g/L glukoze, stabilnim glutaminom, 2,0 mM natrijevega piruvata, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
15 let
Etnična pripadnost
Kavkaški