U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107

A linhagem celular U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 representa uma variante especializada da amplamente utilizada linhagem celular de osteossarcoma humano U-2 OS. Esse modelo específico foi desenvolvido para expressar a versão marcada com SNAP da nucleoporina Nup107, um componente fundamental do complexo de poros nucleares, essencial para o transporte de moléculas entre o núcleo e o citoplasma. A integração da tecnologia de marcação SNAP permite a marcação biorortogonal e a visualização da Nup107 em células vivas ou fixadas, proporcionando uma ferramenta poderosa para o estudo do transporte nucleocitoplasmático e da arquitetura do complexo de poros nucleares em condições fisiológicas.

A linhagem U-2 OS oferece várias vantagens, incluindo taxas de crescimento robustas e um cariótipo bem caracterizado, o que viabiliza aplicações de triagem de alto rendimento e estudos genômicos. A tecnologia ZFN (nuclease de dedo de zinco) utilizada nesta linhagem celular facilita a edição genômica direcionada, aumentando a precisão com que os pesquisadores podem investigar as contribuições genéticas para o transporte nuclear e outros processos celulares. Esta linhagem celular é particularmente útil para estudos que visam elucidar a dinâmica e a regulação dos complexos de poros nucleares na biologia do câncer e na fisiologia celular.

Devido à natureza especializada da linha celular U-2 OS-ZFN-SNAP-Nup107 n.º 294, ela é altamente adequada para técnicas avançadas de imagem, incluindo microscopia de super-resolução, para explorar as funções das nucleoporinas com um nível de detalhe sem precedentes. É também um recurso valioso para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas direcionadas às vias de transporte nuclear implicadas em várias doenças, incluindo o câncer. O componente SNAP-tag agrega versatilidade para análises bioquímicas e proteômicas adicionais, tornando-a uma ferramenta indispensável no campo da biologia celular e molecular.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.