Tế bào U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

Dòng tế bào U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP là một dòng tế bào biến đổi gen được phát triển từ dòng tế bào ung thư xương người U-2 OS gốc. Dòng tế bào này chứa một đoạn chèn mục tiêu của protein phát quang xanh tăng cường dạng đơn thể (mEGFP) tại vị trí gen NUP96, được thực hiện thông qua công nghệ chỉnh sửa gen CRISPR-Cas9. NUP96, một thành phần của phức hợp lỗ nhân, là yếu tố thiết yếu cho quá trình vận chuyển nhân, và sự kết hợp của nó với mEGFP cho phép quan sát động học của phức hợp lỗ nhân theo thời gian thực dưới kính hiển vi huỳnh quang, cung cấp những hiểu biết quý giá về cơ chế vận chuyển nhân và vận chuyển nhân-chất tế bào.

Clone cụ thể này, được đánh số 195, đã được lựa chọn vì biểu hiện ổn định của protein liên hợp NUP96-mEGFP và duy trì các đặc điểm điển hình của dòng tế bào U-2 OS, bao gồm cấu trúc cytoskeleton vững chắc, điều này rất quan trọng trong các nghiên cứu liên quan đến di chuyển và di căn của tế bào ung thư. Ứng dụng công nghệ CRISPR đảm bảo chỉnh sửa gen chính xác, giảm thiểu tác động ngoài mục tiêu có thể ảnh hưởng đến tính toàn vẹn của kết quả thí nghiệm. Điều này khiến dòng tế bào U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP số 195 đặc biệt hữu ích cho các kỹ thuật hình ảnh độ phân giải cao và nghiên cứu cấu trúc tế bào chi tiết, hỗ trợ nghiên cứu tiên tiến trong sinh học tế bào, nghiên cứu ung thư và hiện tượng vận chuyển nhân.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.