Células U2OS-CRISPR-NUP96-mEGFP

La U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP es una línea celular modificada genéticamente derivada de la línea madre de osteosarcoma humano U-2 OS. Esta línea celular incorpora una inserción dirigida de la proteína verde fluorescente monomérica mejorada (mEGFP) en el locus del gen NUP96, lograda mediante la tecnología de edición genética CRISPR-Cas9. NUP96, parte del complejo del poro nuclear, es esencial para el transporte nuclear, y su fusión con mEGFP permite la visualización en tiempo real de la dinámica del poro nuclear bajo microscopía fluorescente, proporcionando información valiosa sobre los mecanismos de transporte nuclear y el tráfico nucleocitoplasmático.

Este clon específico, numerado 195, ha sido seleccionado por su expresión estable de la proteína de fusión NUP96-mEGFP y mantiene las características típicas del linaje U-2 OS, incluyendo una estructura citoesquelética robusta que es crítica en estudios relacionados con la migración y metástasis de células cancerosas. La aplicación de la tecnología CRISPR garantiza una edición génica precisa, minimizando los efectos fuera del objetivo que podrían comprometer la integridad de los resultados experimentales. Esto hace que el clon U-2 OS-CRISPR-NUP96-mEGFP n.º 195 sea particularmente útil para técnicas de imagen de alta resolución y estudios detallados de arquitectura celular, ayudando en la investigación avanzada en biología celular, investigación del cáncer y fenómenos de transporte nuclear.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía