HT-3

HT-3 – tai žmogaus gimdos kaklelio vėžio ląstelių linija, išskirta iš plokščialąstelinės karcinomos, kuri pasižymi tuo, kad yra HPV-neigiama. Ši ląstelių linija plačiai naudojama tyrimuose, skirtuose ląstelių fiziologijai, ypač susijusiems su jonų kanalų reguliavimu, signalų perdavimu ir citoskeleto dinamikos vaidmeniu ląstelių procesuose. HT-3 ląstelėse stebimas tūriui jautrių chlorido (Cl⁻) kanalų aktyvavimas, kuris yra itin svarbus jų reguliuojamo tūrio sumažėjimo (RVD) reakcijoms esant osmosiniam stresui. Šis mechanizmas yra esminis palaikant ląstelių homeostazę, nes leidžia Cl⁻ ir K⁺ jonams ištekėti, taip palengvindamas vandens judėjimą iš ląstelės, kad po patinimo būtų atkurtas normalus tūris.

Tyrimai su HT-3 ląstelių linija atskleidė, kad tūrio reguliavime dalyvauja tam tikros proteinkinazės C (PKC) izoformos. Ypač svarbu tai, kad PKC-α yra susijusi su tūriui jautrių Cl⁻ kanalų aktyvacija ir RVD reakcijomis. Eksperimentiniai duomenys rodo, kad PKC-α slopinimas, naudojant cheminius blokatorius arba izoformoms specifinius antikūnus, žymiai sutrikdo šių kanalų funkciją, o tai lemia užsitęsusį ląstelių patinimą ir sutrikusį RVD. Tai pabrėžia PKC-α, kaip reguliuojančio veiksnio, vaidmenį HT-3 ląstelių reakcijoje į hipotoninį stresą.

Be to, įrodyta, kad citoskeleto, ypač aktino filamentų ir mikrotubulių, vientisumas yra būtinas tinkamai Cl⁻ kanalų aktyvacijai ir veiksmingam tūrio reguliavimui HT-3 ląstelėse. Aktino filamentų sutrikdymas tokiais agentais kaip citochalazinas B padidina Cl⁻ laidumą ir paveikia ląstelių tūrio atkūrimą, o stabilizuojantys agentai, tokie kaip faloidinas, slopina šių kanalų aktyvumą ir uždelsta RVD. Mikrotubulius modifikuojantys junginiai, tokie kaip kolchicinas ir taksolis, turi skirtingą poveikį, o tai pabrėžia sudėtingą sąveiką tarp citoскеleto struktūrų ir jonų kanalų funkcijos šiose vėžio ląstelėse.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime