HT-3

HT-3 er en human livmoderhalskræftcellelinje, der stammer fra pladecellekarcinom, og som er kendt for at være HPV-negativ. Denne cellelinje er blevet anvendt i vid udstrækning i undersøgelser med fokus på cellefysiologi, især i relation til regulering af ionkanaler, signaltransduktion og cytoskelettets dynamiks rolle i cellulære processer. HT-3-celler udviser aktivering af volumenfølsomme kloridkanaler (Cl⁻), som er afgørende for deres reaktioner i form af reguleret volumenreduktion (RVD) under osmotisk stress. Denne mekanisme er afgørende for opretholdelsen af cellulær homeostase, idet den muliggør udstrømning af Cl⁻- og K⁺-ioner og derved fremmer vandbevægelsen ud af cellen for at genoprette det normale volumen efter opsvulmning.

Forskning i HT-3-cellelinjen har fremhævet, at specifikke proteinkinase C (PKC)-isoformer er involveret i volumenregulering. Især er PKC-α blevet impliceret i aktiveringen af volumenfølsomme Cl⁻-kanaler og RVD-responser. Eksperimentelle data viser, at hæmning af PKC-α, enten ved hjælp af kemiske blokkere eller isoformspecifikke antistoffer, væsentligt forringer disse kanalers funktion, hvilket fører til langvarig cellehævelse og forstyrret RVD. Dette understreger PKC-α's rolle som en regulerende faktor i HT-3-cellernes respons på hypotonisk stress.

Derudover er det påvist, at cytoskelettets integritet, især aktinfilamenter og mikrotubuli, er afgørende for korrekt aktivering af Cl⁻-kanaler og effektiv volumenregulering i HT-3-celler. Forstyrrelse af aktinfilamenter med midler såsom cytochalasin B øger Cl⁻-konduktansen og påvirker genoprettelsen af cellevolumen, mens stabiliserende midler som phalloidin hæmmer disse kanalers aktivitet og forsinker RVD. Mikrotubuli-modulerende forbindelser, såsom colchicin og taxol, har forskellige virkninger, hvilket understreger det komplekse samspil mellem cytoskeletstrukturer og ionkanalfunktion i disse kræftceller.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring