HT-3

HT-3 เป็นสายเซลล์มะเร็งปากมดลูกของมนุษย์ที่มาจากมะเร็งเซลล์สแควมัส และเป็นที่รู้จักว่าเป็นสายเซลล์ที่ไม่มีเชื้อ HPV สายเซลล์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาที่เน้นด้านสรีรวิทยาของเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในด้านการควบคุมช่องไอออน การถ่ายทอดสัญญาณ และบทบาทของพลวัตโครงร่างเซลล์ในกระบวนการของเซลล์ เซลล์ HT-3 แสดงการกระตุ้นของช่องคลอไรด์ (Cl⁻) ที่ไวต่อปริมาตร ซึ่งมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อปฏิกิริยาการลดปริมาตรแบบควบคุม (RVD) ของเซลล์ภายใต้ความเครียดออสโมติก กลไกนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการรักษาสมดุลภายในเซลล์ (homeostasis) โดยอนุญาตให้ไอออน Cl⁻ และ K⁺ ไหลออก ซึ่งช่วยส่งเสริมการเคลื่อนที่ของน้ำออกจากเซลล์เพื่อฟื้นฟูปริมาตรปกติหลังการบวม

การวิจัยเกี่ยวกับสายเซลล์ HT-3 ได้ชี้ให้เห็นถึงบทบาทของไอโซฟอร์มเฉพาะของโปรตีนไคเนสซี (PKC) ในการควบคุมปริมาตร โดยเฉพาะอย่างยิ่ง PKC-α ที่เกี่ยวข้องกับการกระตุ้นช่องคลอไรด์ (Cl⁻) ที่ไวต่อปริมาตรและปฏิกิริยา RVD ข้อมูลจากการทดลองแสดงให้เห็นว่า การยับยั้ง PKC-α โดยใช้สารยับยั้งทางเคมีหรือแอนติบอดีที่จำเพาะต่อไอโซฟอร์ม จะทำให้การทำงานของช่องคลอไรด์เหล่านี้บกพร่องอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งนำไปสู่การบวมของเซลล์ที่ยาวนานขึ้นและการตอบสนอง RVD ที่ถูกรบกวน สิ่งนี้เน้นย้ำถึงบทบาทของ PKC-α ในฐานะปัจจัยควบคุมการตอบสนองของเซลล์ HT-3 ต่อความเครียดจากภาวะไฮโปโทนิก

นอกจากนี้ ยังได้พิสูจน์แล้วว่าความสมบูรณ์ของโครงร่างเซลล์ (cytoskeleton) โดยเฉพาะอย่างยิ่งเส้นแอคติน (actin filaments) และไมโครทูบูล (microtubules) เป็นปัจจัยสำคัญสำหรับการกระตุ้นช่อง Cl⁻ อย่างถูกต้องและการควบคุมปริมาตรอย่างมีประสิทธิภาพในเซลล์ HT-3 การทำลายเส้นใยแอคตินด้วยสารเช่น ไซโตคาลาซิน บี (cytochalasin B) จะเพิ่มการนำ Cl⁻ และส่งผลต่อการฟื้นตัวของปริมาตรเซลล์ ในขณะที่สารทำให้เสถียรเช่น ฟัลโลอิดิน (phalloidin) จะยับยั้งกิจกรรมของช่องเหล่านี้และทำให้ RVD ช้าลง สารที่ปรับแต่งไมโครทูบูล เช่น โคลชิซีน และแทกซอล มีผลกระทบที่แตกต่างกัน ซึ่งชี้ให้เห็นถึงความสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างโครงสร้างไซโตสเกเลตันกับหน้าที่ของช่องไอออนในเซลล์มะเร็งเหล่านี้

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.