HT-3

HT-3 er en humant livmorhalskreftcellelinje avledet fra plateepitelkarsinom og er kjent for å være HPV-negativ. Denne cellelinjen har blitt mye brukt i studier med fokus på cellefysiologi, særlig i forbindelse med regulering av ionekanaler, signaltransduksjon og cytoskelettdynamikkens rolle i cellulære prosesser. HT-3-celler viser aktivering av volumsensitive kloridkanaler (Cl⁻), som er avgjørende for deres responser i form av regulatorisk volumreduksjon (RVD) under osmotisk stress. Denne mekanismen er avgjørende for å opprettholde cellulær homeostase ved å tillate utstrømning av Cl⁻- og K⁺-ioner, og dermed legge til rette for vannbevegelse ut av cellen for å gjenopprette normalt volum etter hevelse.

Forskning på HT-3-cellelinjen har vist at spesifikke isoformer av proteinkinase C (PKC) er involvert i volumregulering. Spesielt har PKC-α blitt knyttet til aktivering av volumsensitive Cl⁻-kanaler og RVD-responser. Eksperimentelle data viser at hemming av PKC-α, enten ved bruk av kjemiske blokkere eller isoformspesifikke antistoffer, svekker disse kanalenes funksjon betydelig, noe som fører til langvarig cellehevelse og forstyrret RVD. Dette understreker PKC-αs rolle som en regulerende faktor i HT-3-cellers respons på hypotonisk stress.

I tillegg har det blitt påvist at integriteten til cytoskelettet, særlig aktinfilamenter og mikrotubuli, er avgjørende for riktig aktivering av Cl⁻-kanaler og effektiv volumregulering i HT-3-celler. Forstyrrelse av aktinfilamenter med midler som cytochalasin B øker Cl⁻-konduktansen og påvirker gjenopprettingen av cellevolumet, mens stabiliserende midler som falloidin hemmer disse kanalene og forsinker RVD. Mikrotubuli-modulerende forbindelser, som kolkisin og taksol, har forskjellige effekter, noe som understreker det komplekse samspillet mellom cytoskelettstrukturer og ionekanalfunksjon i disse kreftcellene.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring