HT-3

HT-3は、扁平上皮癌由来のヒト子宮頸がん細胞株であり、HPV陰性であることが知られている。この細胞株は、細胞生理学、特にイオンチャネルの調節、シグナル伝達、および細胞プロセスにおける細胞骨格の動態の役割に焦点を当てた研究で広く利用されてきた。 HT-3細胞は、浸透圧ストレス下での調節性体積減少（RVD）反応に不可欠な、体積感受性塩化物（Cl⁻）チャネルの活性化を示す。 このメカニズムは、Cl⁻およびK⁺イオンの流出を可能にし、それによって細胞外への水分の移動を促進して、腫脹後の正常な体積を回復させることで、細胞の恒常性を維持する上で極めて重要である。

HT-3細胞株に関する研究により、体積調節に特定のプロテインキナーゼC（PKC）アイソフォームが関与していることが明らかになった。特に、PKC-αは、体積感受性Cl⁻チャネルの活性化およびRVD反応に関与していることが示唆されている。 実験データによると、化学的阻害剤またはアイソフォーム特異的抗体を用いてPKC-αを阻害すると、これらのチャネルの機能が著しく損なわれ、細胞の腫脹が長期化し、RVDが阻害されることが示されている。これは、低張ストレスに対するHT-3細胞の応答において、PKC-αが調節因子として重要な役割を果たしていることを裏付けている。

さらに、細胞骨格、特にアクチンフィラメントや微小管の完全性は、HT-3細胞におけるCl⁻チャネルの適切な活性化および効果的な体積調節に不可欠であることが実証されている。 サイトカラシンBなどの薬剤によるアクチンフィラメントの破壊は、Cl⁻伝導度を高め、細胞体積の回復に影響を与える一方、ファロイディンなどの安定化剤は、これらのチャネルの活性を阻害し、RVDを遅延させる。 コルヒチンやタキソールなどの微小管調節化合物は、それぞれ異なる影響を及ぼし、これらのがん細胞における細胞骨格構造とイオンチャネル機能との間の複雑な相互作用を浮き彫りにしている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。