HT-3

HT-3 to ludzka linia komórkowa raka szyjki macicy wywodząca się z raka płaskonabłonkowego, charakteryzująca się brakiem obecności wirusa HPV. Linia ta jest szeroko stosowana w badaniach dotyczących fizjologii komórkowej, zwłaszcza w kontekście regulacji kanałów jonowych, transdukcji sygnałów oraz roli dynamiki cytoszkieletu w procesach komórkowych. Komórki HT-3 wykazują aktywację wrażliwych na objętość kanałów chlorkowych (Cl⁻), które mają kluczowe znaczenie dla ich reakcji regulacyjnego zmniejszenia objętości (RVD) w warunkach stresu osmotycznego. Mechanizm ten ma kluczowe znaczenie dla utrzymania homeostazy komórkowej, umożliwiając wypływ jonów Cl⁻ i K⁺, a tym samym ułatwiając przemieszczanie się wody na zewnątrz komórki w celu przywrócenia normalnej objętości po obrzęku.

Badania nad linią komórkową HT-3 wykazały udział określonych izoform kinazy białkowej C (PKC) w regulacji objętości. Warto zauważyć, że PKC-α ma znaczenie w aktywacji wrażliwych na objętość kanałów Cl⁻ oraz w reakcjach RVD. Dane eksperymentalne wskazują, że hamowanie PKC-α – zarówno za pomocą blokujących związków chemicznych, jak i przeciwciał specyficznych dla tej izoformy – znacząco upośledza funkcjonowanie tych kanałów, prowadząc do przedłużonego pęcznienia komórek i zaburzeń RVD. Podkreśla to rolę PKC-α jako czynnika regulacyjnego w odpowiedzi komórek HT-3 na stres hipotoniczny.

Ponadto wykazano, że integralność cytoszkieletu, a w szczególności włókien aktynowych i mikrotubul, ma zasadnicze znaczenie dla prawidłowej aktywacji kanałów Cl⁻ i skutecznej regulacji objętości w komórkach HT-3. Zakłócenie struktury włókien aktynowych za pomocą środków takich jak cytochalazyna B zwiększa przewodnictwo Cl⁻ i wpływa na przywrócenie objętości komórkowej, podczas gdy środki stabilizujące, takie jak faloidyna, hamują aktywność tych kanałów i opóźniają RVD. Związki modulujące mikrotubule, takie jak kolchicyna i taksol, wywierają zróżnicowany wpływ, co podkreśla złożoną interakcję między strukturami cytoszkieletu a funkcjonowaniem kanałów jonowych w tych komórkach nowotworowych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym