HT-3

HT-3 on inimese emakakaelavähi rakuliin, mis on saadud lamerakulise kartsinoomi rakkudest ja mida iseloomustab HPV-negatiivsus. Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud rakufüsioloogiale keskenduvates uuringutes, eelkõige seoses ioonikanalite regulatsiooniga, signaaliülekandega ja tsütoskeleti dünaamika rolliga rakuprotsessides. HT-3 rakkudes on täheldatud mahutundlike kloriidkanalite (Cl⁻) aktiveerumist, mis on otsustava tähtsusega nende regulatiivse mahu vähenemise (RVD) reaktsioonide puhul osmootilise stressi tingimustes. See mehhanism on rakkude homöostaasi säilitamisel otsustava tähtsusega, kuna võimaldab Cl⁻- ja K⁺-ioonide väljavoolu, soodustades seeläbi vee liikumist rakust välja, et taastada normaalne maht pärast turse tekkimist.

HT-3 rakuliini uuringud on toonud esile spetsiifiliste proteiinkinaasi C (PKC) isoformide osaluse mahu reguleerimises. Eelkõige on PKC-α seotud mahutundlike Cl⁻-kanalite aktiveerimise ja RVD-reaktsioonidega. Eksperimentaalsed andmed näitavad, et PKC-α inhibeerimine kas keemiliste blokaatorite või isoformispetsiifiliste antikehade abil kahjustab oluliselt nende kanalite funktsiooni, põhjustades pikalevenivat rakkude paisumist ja häiritud RVD-d. See rõhutab PKC-α rolli regulatoorse faktorina HT-3 rakkude reaktsioonis hüpotoonilisele stressile.

Lisaks on tõestatud, et tsütoskeleti, eriti aktiinfilamentide ja mikrotubulite terviklikkus on HT-3-rakkudes Cl⁻-kanalite nõuetekohaseks aktiveerimiseks ja efektiivseks mahuregulatsiooniks hädavajalik. Aktiinfilamentide häirimine selliste ainetega nagu tsütokalasiin B suurendab Cl⁻-juhtivust ja mõjutab rakumahu taastumist, samas kui stabiliseerivad ained nagu falloidiin pärsivad nende kanalite aktiivsust ja viivitavad RVD-d. Mikrotubuleid mõjutavatel ühenditel, nagu kolhitsiin ja taksol, on erinev mõju, mis rõhutab tsütoskeleti struktuuride ja ioonikanalite funktsiooni vahelist keerukat vastastikmõju nendes vähirakkudes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest