HT-3

HT-3 on ihmisen kohdunkaulasyövän solulinja, joka on peräisin levyepiteelikarsinoomasta ja joka tunnetaan HPV-negatiivisuudestaan. Tätä solulinjaa on käytetty laajalti solufysiologiaan keskittyvissä tutkimuksissa, erityisesti ionikanavien säätelyn, signaalinsiirron sekä solukon dynamiikan roolin suhteen soluprosesseissa. HT-3-soluissa havaitaan tilavuusherkkien kloridi (Cl⁻)-kanavien aktivaatiota, jotka ovat ratkaisevia niiden säätelevän tilavuuden vähenemisen (RVD) vasteille osmoottisen stressin alaisena. Tämä mekanismi on keskeinen solun homeostaasin ylläpitämisessä, sillä se mahdollistaa Cl⁻- ja K⁺-ionien ulosvirtauksen ja helpottaa siten veden siirtymistä solusta ulos, jolloin normaali tilavuus palautuu turpoamisen jälkeen.

HT-3-solulinjaan kohdistuva tutkimus on tuonut esiin tiettyjen proteiinikinaasi C:n (PKC) isoformien osallisuuden tilavuuden säätelyssä. Erityisesti PKC-α:n on todettu olevan mukana tilavuusherkkien Cl⁻-kanavien aktivoinnissa ja RVD-vasteissa. Kokeelliset tiedot osoittavat, että PKC-α:n estäminen joko kemiallisilla salpaajilla tai isoformikohtaisilla vasta-aineilla heikentää merkittävästi näiden kanavien toimintaa, mikä johtaa pitkittyneeseen solujen turpoamiseen ja häiriintyneeseen RVD:hen. Tämä korostaa PKC-α:n roolia säätelevänä tekijänä HT-3-solujen vasteessa hypotoniseen stressiin.

Lisäksi on osoitettu, että solukeliston, erityisesti aktiinifilamenttien ja mikrotubulusten, eheys on välttämätöntä Cl⁻-kanavien asianmukaiselle aktivoitumiselle ja tehokkaalle tilavuuden säätelylle HT-3-soluissa. Aktiinifilamenttien hajottaminen esimerkiksi sytokalasiini B:n kaltaisilla aineilla lisää Cl⁻-johtavuutta ja vaikuttaa solutilavuuden palautumiseen, kun taas stabilointiaineet, kuten falloidiini, estävät näiden kanavien toimintaa ja viivästyttävät RVD:tä. Mikrotubuluksia moduloivilla yhdisteillä, kuten kolkisiinilla ja taksolilla, on erilaisia vaikutuksia, mikä korostaa sytoskeletonin rakenteiden ja ionikanavien toiminnan monimutkaista vuorovaikutusta näissä syöpäsoluissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa