HT-3

HT-3 è una linea cellulare di carcinoma cervicale umano derivata da un carcinoma a cellule squamose ed è nota per essere HPV-negativa. Questa linea cellulare è stata ampiamente utilizzata in studi incentrati sulla fisiologia cellulare, in particolare in relazione alla regolazione dei canali ionici, alla trasduzione del segnale e al ruolo delle dinamiche del citoscheletro nei processi cellulari. Le cellule HT-3 mostrano l’attivazione dei canali del cloruro (Cl⁻) sensibili al volume, fondamentali per le loro risposte di diminuzione regolatoria del volume (RVD) in condizioni di stress osmotico. Questo meccanismo è fondamentale per il mantenimento dell’omeostasi cellulare, poiché consente l’efflusso di ioni Cl⁻ e K⁺, facilitando così il movimento dell’acqua fuori dalla cellula per ripristinare il volume normale dopo il rigonfiamento.

La ricerca sulla linea cellulare HT-3 ha evidenziato il coinvolgimento di specifiche isoforme della proteina chinasi C (PKC) nella regolazione del volume. In particolare, la PKC-α è stata implicata nell’attivazione dei canali del Cl⁻ sensibili al volume e nelle risposte di RVD. I dati sperimentali mostrano che l’inibizione della PKC-α, mediante bloccanti chimici o anticorpi specifici per l’isoforma, compromette significativamente la funzione di questi canali, portando a un rigonfiamento cellulare prolungato e a un’interruzione della RVD. Ciò sottolinea il ruolo della PKC-α come fattore regolatore nella risposta delle cellule HT-3 allo stress ipotonico.

Inoltre, è stato dimostrato che l’integrità del citoscheletro, in particolare dei filamenti di actina e dei microtubuli, è essenziale per la corretta attivazione dei canali Cl⁻ e per un’efficace regolazione del volume nelle cellule HT-3. La distruzione dei filamenti di actina con agenti quali la citochalasina B aumenta la conduttanza del Cl⁻ e influisce sul recupero del volume cellulare, mentre agenti stabilizzanti come la falloidina inibiscono l’attività di questi canali e ritardano la RVD. I composti che modulano i microtubuli, come la colchicina e il taxolo, hanno effetti differenziali, evidenziando la complessa interazione tra le strutture del citoscheletro e la funzione dei canali ionici in queste cellule tumorali.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia