HT-3

HT-3, skuamöz hücreli karsinomdan türetilmiş bir insan serviks kanseri hücre hattıdır ve HPV-negatif olmasıyla bilinir. Bu hücre hattı, hücre fizyolojisine odaklanan çalışmalarda, özellikle iyon kanalı düzenlemesi, sinyal iletimi ve hücre süreçlerinde sitoskeletal dinamiklerin rolü ile ilgili araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. HT-3 hücreleri, ozmotik stres altında düzenleyici hacim azalması (RVD) tepkileri için hayati önem taşıyan hacme duyarlı klorür (Cl⁻) kanallarının aktivasyonunu gösterir. Bu mekanizma, Cl⁻ ve K⁺ iyonlarının dışarı akışına izin vererek hücresel homeostazı korumada kilit rol oynar; böylece şişmeden sonra normal hacmi geri kazanmak üzere suyun hücreden dışarı hareketini kolaylaştırır.

HT-3 hücre hattı üzerine yapılan araştırmalar, hacim düzenlemesinde belirli protein kinaz C (PKC) izoformlarının rolünü ortaya koymuştur. Özellikle PKC-α'nın, hacme duyarlı Cl⁻ kanallarının aktivasyonu ve RVD tepkileriyle ilişkili olduğu saptanmıştır. Deneysel veriler, kimyasal blokerler veya izoforma özgü antikorlar kullanılarak PKC-α'nın inhibisyonunun, bu kanalların işlevini önemli ölçüde bozduğunu ve bunun da hücre şişmesinin uzamasına ve RVD'nin bozulmasına yol açtığını göstermektedir. Bu durum, HT-3 hücrelerinin hipotonik strese verdiği yanıtta PKC-α'nın bir düzenleyici faktör olarak rolünü vurgulamaktadır.

Ek olarak, sitoskeletonun bütünlüğünün, özellikle de aktin filamentleri ve mikrotübüllerin, HT-3 hücrelerinde Cl⁻ kanallarının düzgün aktivasyonu ve etkili hacim düzenlemesi için hayati öneme sahip olduğu gösterilmiştir. Sitochalasin B gibi ajanlarla aktin filamentlerinin bozulması, Cl⁻ iletkenliğini artırır ve hücre hacminin geri kazanılmasını etkilerken, falloidin gibi stabilize edici ajanlar bu kanalların aktivitesini inhibe eder ve RVD'yi geciktirir. Kolşisin ve taksol gibi mikrotübül modülatör bileşiklerin farklı etkileri vardır; bu da bu kanser hücrelerinde sitoskeletal yapılar ile iyon kanalı fonksiyonu arasındaki karmaşık etkileşimi ortaya koymaktadır.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın