HT-3

HT-3 ir cilvēka dzemdes kakla vēža šūnu līnija, kas iegūta no plakanšūnu karcinomas, un tā ir pazīstama kā HPV-negatīva. Šo šūnu līniju plaši izmanto pētījumos, kas veltīti šūnu fizioloģijai, jo īpaši saistībā ar jonu kanālu regulāciju, signālu pārraidi un citoskeleta dinamikas lomu šūnu procesos. HT-3 šūnas parāda apjoma jutīgo hlorīda (Cl⁻) kanālu aktivāciju, kas ir būtiska to regulatīvās apjoma samazināšanās (RVD) reakcijām osmotiskā stresa apstākļos. Šis mehānisms ir izšķirošs šūnu homeostāzes uzturēšanā, jo tas ļauj Cl⁻ un K⁺ joniem izplūst, tādējādi veicinot ūdens izplūšanu no šūnas, lai pēc pietūkuma atjaunotu normālo tilpumu.

Pētījumi par HT-3 šūnu līniju ir parādījuši, ka apjoma regulācijā ir iesaistītas specifiskas proteīna kināzes C (PKC) izoformas. Jo īpaši PKC-α ir saistīta ar apjomjutīgo Cl⁻ kanālu aktivāciju un RVD reakcijām. Eksperimentālie dati liecina, ka PKC-α inhibīcija, izmantojot vai nu ķīmiskos blokatorus, vai izoformām specifiskas antivielas, ievērojami traucē šo kanālu darbību, izraisot ilgstošu šūnu pietūkumu un RVD traucējumus. Tas uzsver PKC-α lomu kā regulējošu faktoru HT-3 šūnu reakcijā uz hipotonicitātes stresu.

Turklāt ir pierādīts, ka citoskeleta, jo īpaši aktīna filamentu un mikrotubulu, integritāte ir būtiska Cl⁻ kanālu pareizai aktivācijai un efektīvai tilpuma regulācijai HT-3 šūnās. Aktīna filamentu traucējumi, ko izraisa tādi līdzekļi kā citohalazīns B, palielina Cl⁻ vadītspēju un ietekmē šūnu tilpuma atjaunošanos, savukārt stabilizatori, piemēram, faloidīns, inhibē šo kanālu aktivitāti un aizkavē RVD. Mikrotubulu darbību modulējošiem savienojumiem, piemēram, kolhicīnam un taksolam, ir atšķirīga ietekme, kas uzsver sarežģīto mijiedarbību starp citoskeleta struktūrām un jonu kanālu funkcijām šajās vēža šūnās.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu