HT-3

HT-3 je človeška celična linija raka materničnega vratu, ki izhaja iz skvamoznega karcinoma in je znana po tem, da je HPV-negativna. Ta celična linija se široko uporablja v raziskavah, osredotočenih na celično fiziologijo, zlasti v povezavi z regulacijo ionskih kanalov, signalno transdukcijo in vlogo dinamike citoскеletne mreže v celičnih procesih. Celice HT-3 kažejo aktivacijo na volumen občutljivih kloridnih (Cl⁻) kanalov, ki so ključni za njihove odzive reguliranega zmanjšanja volumna (RVD) pod osmotskim stresom. Ta mehanizem je ključen za ohranjanje celične homeostaze, saj omogoča iztok ionov Cl⁻ in K⁺, s čimer olajša izstop vode iz celice in tako po otekanju ponovno vzpostavi normalni volumen.

Raziskave celične linije HT-3 so poudarile vpletenost specifičnih izoform proteinske kinaze C (PKC) v regulacijo volumna. Zlasti je bila PKC-α povezana z aktivacijo na volumen občutljivih kanalov Cl⁻ in odzivov RVD. Eksperimentalni podatki kažejo, da zaviranje PKC-α, bodisi s kemičnimi zaviralci bodisi z izoformno specifičnimi protitelesi, znatno ovira delovanje teh kanalov, kar vodi do podaljšanega nabrekanja celic in motenega RVD. To poudarja vlogo PKC-α kot regulativnega faktorja v odzivu celic HT-3 na hipotonični stres.

Poleg tega je bilo dokazano, da je celovitost citoскеlet, zlasti aktinskih filamentov in mikrotubulov, bistvena za pravilno aktivacijo Cl⁻-kanalov in učinkovito regulacijo volumna v celicah HT-3. Motnja aktinskih filamentov s sredstvi, kot je citochalazin B, poveča prevodnost Cl⁻ in vpliva na obnovo celičnega volumna, medtem ko stabilizirajoča sredstva, kot je faloidin, zavirajo aktivnost teh kanalov in upočasnjujejo RVD. Spojine, ki modulirajo mikrotubule, kot sta kolhicin in taksol, imajo različne učinke, kar poudarja zapleteno medsebojno delovanje med strukturami citoскеletov in delovanjem ionskih kanalov v teh rakavih celicah.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo