Skip to content
HT-3
Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô
Metastatic site
Hạch bạch huyết
Synonyms
HT3

Documents

HT-3

Cell line · Product number 305521

HT-3 is a human cervical cancer cell line derived from squamous cell carcinoma and is noted for being HPV-negative. This cell line has been widely used in...

€420.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HT-3 là một dòng tế bào ung thư cổ tử cung ở người có nguồn gốc từ ung thư biểu mô vảy và được biết đến là dòng tế bào âm tính với HPV. Dòng tế bào này đã được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu tập trung vào sinh lý học tế bào, đặc biệt liên quan đến sự điều hòa kênh ion, truyền tín hiệu và vai trò của động học bộ khung tế bào trong các quá trình tế bào. Các tế bào HT-3 thể hiện sự kích hoạt các kênh clorua (Cl⁻) nhạy cảm với thể tích, vốn rất quan trọng đối với phản ứng giảm thể tích điều hòa (RVD) của chúng dưới áp lực thẩm thấu. Cơ chế này đóng vai trò then chốt trong việc duy trì cân bằng nội môi tế bào bằng cách cho phép sự thoát ra của các ion Cl⁻ và K⁺, từ đó tạo điều kiện cho nước di chuyển ra khỏi tế bào để khôi phục thể tích bình thường sau khi sưng.

Các nghiên cứu về dòng tế bào HT-3 đã làm sáng tỏ sự tham gia của các đồng dạng cụ thể của protein kinase C (PKC) trong điều hòa thể tích. Đáng chú ý, PKC-α được cho là có liên quan đến việc kích hoạt các kênh Cl⁻ nhạy cảm với thể tích và các phản ứng RVD. Dữ liệu thực nghiệm cho thấy việc ức chế PKC-α, bằng cách sử dụng các chất ức chế hóa học hoặc kháng thể đặc hiệu từng đồng dạng, làm suy giảm đáng kể chức năng của các kênh này, dẫn đến tình trạng sưng tế bào kéo dài và rối loạn phản ứng RVD. Điều này nhấn mạnh vai trò của PKC-α như một yếu tố điều hòa trong phản ứng của tế bào HT-3 đối với stress hạ thẩm thấu.

Ngoài ra, tính toàn vẹn của bộ khung tế bào, đặc biệt là các sợi actin và vi ống, đã được chứng minh là rất cần thiết cho việc kích hoạt đúng các kênh Cl⁻ và điều hòa thể tích hiệu quả trong tế bào HT-3. Sự phá vỡ các sợi actin bằng các chất như cytochalasin B làm tăng độ dẫn Cl⁻ và ảnh hưởng đến quá trình phục hồi thể tích tế bào, trong khi các chất ổn định như phalloidin ức chế hoạt động của các kênh này và làm chậm quá trình RVD. Các hợp chất điều chỉnh vi ống, chẳng hạn như colchicine và taxol, có những tác động khác nhau, nêu bật sự tương tác phức tạp giữa các cấu trúc cytoskeleton và chức năng kênh ion trong các tế bào ung thư này.

Tissue
Cổ tử cung
Disease
Ung thư biểu mô
Metastatic site
Hạch bạch huyết
Synonyms
  • HT3

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, ở chuột nude

04Identifiers

Citation
HT-3 (Mã sản phẩm Cytion 305521)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1293

05Expression and susceptibility

Antigen expression
Các gen được biểu hiện: Nhóm máu A, Rh+
Oncogenes
P53 dương tính, pRB dương tính
Mutational profile
Đột biến: TP53, p.Gly245Val (c.734G>T)

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, chứa: 3,0 g/L glucose, chứa: glutamine ổn định, chứa: 2,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
58 năm
Ethnicity
Người da trắng