Μετάβαση στο περιεχόμενο
HT-3
Ιστός
Τράχηλος μήτρας
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Λεμφαδένας
Συνώνυμα
HT3

Έγγραφα

HT-3

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305521

Η HT-3 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του τραχήλου της μήτρας που προέρχεται από πλακώδες καρκίνωμα και διακρίνεται για το ότι είναι αρνητική στον HPV. Αυτή η κυτταρική σειρά έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως σε...

€420.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η HT-3 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά καρκίνου του τραχήλου της μήτρας που προέρχεται από πλακώδες καρκίνωμα και διακρίνεται για το ότι είναι αρνητική στον HPV. Αυτή η κυτταρική σειρά έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως σε μελέτες που εστιάζουν στην κυτταρική φυσιολογία, ιδίως σε σχέση με τη ρύθμιση των ιοντικών διαύλων, τη μεταγωγή σήματος και τον ρόλο της δυναμικής του κυτταροσκελετού στις κυτταρικές διεργασίες. Τα κύτταρα HT-3 παρουσιάζουν ενεργοποίηση διαύλων χλωρίου (Cl⁻) ευαίσθητων στον όγκο, οι οποίοι είναι ζωτικής σημασίας για τις αντιδράσεις ρυθμιστικής μείωσης του όγκου (RVD) υπό οσμωτικό στρες. Αυτός ο μηχανισμός είναι καθοριστικός για τη διατήρηση της κυτταρικής ομοιόστασης, καθώς επιτρέπει την εκροή ιόντων Cl⁻ και K⁺, διευκολύνοντας έτσι τη μετακίνηση νερού έξω από το κύτταρο για την αποκατάσταση του φυσιολογικού όγκου μετά το πρήξιμο.

Η έρευνα σχετικά με τη κυτταρική σειρά HT-3 έχει αναδείξει τη συμμετοχή συγκεκριμένων ισομορφών της πρωτεϊνικής κινάσης C (PKC) στη ρύθμιση του όγκου. Συγκεκριμένα, η PKC-α έχει συνδεθεί με την ενεργοποίηση των ευαίσθητων στον όγκο διαύλων Cl⁻ και των αντιδράσεων RVD. Πειραματικά δεδομένα δείχνουν ότι η αναστολή της PKC-α, είτε με τη χρήση χημικών αναστολέων είτε με αντισώματα ειδικά για την ισομορφή, επηρεάζει σημαντικά τη λειτουργία αυτών των διαύλων, οδηγώντας σε παρατεταμένο πρήξιμο των κυττάρων και διαταραχή της RVD. Αυτό υπογραμμίζει τον ρόλο της PKC-α ως ρυθμιστικού παράγοντα στην απόκριση των κυττάρων HT-3 στο υποτονικό στρες.

Επιπλέον, έχει αποδειχθεί ότι η ακεραιότητα του κυτταροσκελετού, ιδίως των νηματίων ακτίνης και των μικροσωληναρίων, είναι απαραίτητη για την ορθή ενεργοποίηση των διαύλων Cl⁻ και την αποτελεσματική ρύθμιση του όγκου στα κύτταρα HT-3. Η διαταραχή των νηματίων ακτίνης με παράγοντες όπως η κυτοχαλασίνη Β ενισχύει την αγωγιμότητα του Cl⁻ και επηρεάζει την αποκατάσταση του κυτταρικού όγκου, ενώ οι σταθεροποιητικοί παράγοντες όπως η φαλλοϊδίνη αναστέλλουν τη δραστηριότητα αυτών των διαύλων και καθυστερούν την RVD. Οι ενώσεις που ρυθμίζουν τους μικροσωληνίσκους, όπως η κολχικίνη και η ταξόλη, έχουν διαφορετικές επιδράσεις, υπογραμμίζοντας την πολύπλοκη αλληλεπίδραση μεταξύ των δομών του κυτταροσκελετού και της λειτουργίας των ιοντικών διαύλων σε αυτά τα καρκινικά κύτταρα.

Ιστός
Τράχηλος μήτρας
Ασθένεια
Καρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Λεμφαδένας
Συνώνυμα
  • HT3

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HT-3 (αριθμός καταλόγου Cytion 305521)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1293

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση αντιγόνου
Γονίδια που εκφράζονται: Ομάδα αίματος Α, Rh+
Ογκογονίδια
P53+, pRB+
Προφίλ μεταλλάξεων
Μετάλλαξη: TP53, p.Gly245Val (c.734G>T)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
McCoys 5a, w: 3,0 g/L γλυκόζη, w: σταθερή γλουταμίνη, w: 2,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 2,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820200a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
58 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος