HT-3

HT-3 adalah garis sel kanker serviks manusia yang berasal dari karsinoma sel skuamosa dan dikenal sebagai garis sel yang negatif terhadap HPV. Garis sel ini telah banyak digunakan dalam penelitian yang berfokus pada fisiologi seluler, khususnya terkait regulasi saluran ion, transduksi sinyal, dan peran dinamika sitoskeleton dalam proses seluler. Sel HT-3 menunjukkan aktivasi saluran klorida (Cl⁻) yang sensitif terhadap volume, yang sangat penting untuk respons penurunan volume regulasi (RVD) di bawah tekanan osmotik. Mekanisme ini sangat penting untuk menjaga homeostasis seluler dengan memungkinkan aliran keluar ion Cl⁻ dan K⁺, sehingga memfasilitasi perpindahan air keluar dari sel untuk memulihkan volume normal setelah pembengkakan.

Penelitian terhadap garis sel HT-3 telah menyoroti keterlibatan isoform protein kinase C (PKC) tertentu dalam regulasi volume. Secara khusus, PKC-α telah dikaitkan dengan aktivasi saluran klorida sensitif volume dan respons RVD. Data eksperimental menunjukkan bahwa penghambatan PKC-α, baik menggunakan penghambat kimia maupun antibodi spesifik isoform, secara signifikan mengganggu fungsi saluran-saluran tersebut, yang mengakibatkan pembengkakan sel yang berkepanjangan dan gangguan pada RVD. Hal ini menegaskan peran PKC-α sebagai faktor pengatur dalam respons sel HT-3 terhadap stres hipotonik.

Selain itu, telah dibuktikan bahwa integritas sitoskeleton, khususnya filamen aktin dan mikrotubulus, sangat penting untuk aktivasi yang tepat dari saluran Cl⁻ dan regulasi volume yang efektif pada sel HT-3. Gangguan pada filamen aktin dengan agen seperti sitochalasin B meningkatkan konduktansi Cl⁻ dan memengaruhi pemulihan volume sel, sementara agen penstabil seperti phalloidin menghambat aktivitas saluran-saluran ini dan menunda RVD. Senyawa pengatur mikrotubulus, seperti kolkisin dan taksol, memiliki dampak yang berbeda-beda, yang menyoroti interaksi kompleks antara struktur sitoskeleton dan fungsi saluran ion dalam sel-sel kanker ini.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami