HT-3

HT-3 is een menselijke baarmoederhalskankercellijn die is afgeleid van plaveiselcelcarcinoom en staat bekend als HPV-negatief. Deze cellijn wordt op grote schaal gebruikt in onderzoeken gericht op cellulaire fysiologie, met name met betrekking tot de regulatie van ionenkanalen, signaaltransductie en de rol van cytoskeletdynamica in cellulaire processen. HT-3-cellen vertonen activering van volumegevoelige chloride (Cl⁻)-kanalen, die cruciaal zijn voor hun regulerende volumevermindering (RVD) als reactie op osmotische stress. Dit mechanisme is van cruciaal belang voor het handhaven van de cellulaire homeostase doordat het de uitstroom van Cl⁻- en K⁺-ionen mogelijk maakt, waardoor de verplaatsing van water uit de cel wordt bevorderd om het normale volume na zwelling te herstellen.

Onderzoek naar de HT-3-cellijn heeft de betrokkenheid van specifieke isoformen van proteïnekinase C (PKC) bij volumeregulatie aan het licht gebracht. Met name PKC-α is in verband gebracht met de activering van volumegevoelige Cl⁻-kanalen en RVD-reacties. Experimentele gegevens tonen aan dat remming van PKC-α, hetzij met chemische blokkers, hetzij met isoform-specifieke antilichamen, de functie van deze kanalen aanzienlijk verstoort, wat leidt tot langdurige celzwelling en een verstoorde RVD. Dit onderstreept de rol van PKC-α als regulerende factor in de reactie van HT-3-cellen op hypotone stress.

Bovendien is aangetoond dat de integriteit van het cytoskelet, met name actinefilamenten en microtubuli, essentieel is voor de juiste activering van Cl⁻-kanalen en effectieve volumeregulatie in HT-3-cellen. Verstoring van actinefilamenten met middelen zoals cytochalasine B verhoogt de Cl⁻-geleiding en beïnvloedt het herstel van het celvolume, terwijl stabiliserende middelen zoals falloidine de activiteit van deze kanalen remmen en RVD vertragen. Microtubuli-modulerende verbindingen, zoals colchicine en taxol, hebben uiteenlopende effecten, wat de complexe wisselwerking tussen cytoskeletstructuren en de functie van ionenkanalen in deze kankercellen benadrukt.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring