HT-3

Az HT-3 egy laphámsejtes karcinómából származó emberi méhnyakrák-sejtvonal, amelyről ismert, hogy HPV-negatív. Ezt a sejtvonalat széles körben használják a sejtfiziológiára összpontosító kutatásokban, különösen az ioncsatornák szabályozásával, a jelátvitellel, valamint a citoszkeletális dinamika sejtfolyamatokban betöltött szerepével kapcsolatban. Az HT-3 sejtekben megfigyelhető a térfogatérzékeny klorid (Cl⁻) csatornák aktiválódása, amelyek döntő szerepet játszanak az ozmotikus stressz hatására bekövetkező szabályozó térfogatcsökkenés (RVD) reakciókban. Ez a mechanizmus kulcsfontosságú a sejt homeosztázisának fenntartásában, mivel lehetővé teszi a Cl⁻ és K⁺ ionok kiáramlását, ezáltal elősegítve a víz sejtből való kiáramlását, hogy a duzzanat után helyreálljon a normális térfogat.

Az HT-3 sejtvonalra irányuló kutatások rávilágítottak arra, hogy a térfogat-szabályozásban specifikus protein-kináz C (PKC) izoformák vesznek részt. Különösen a PKC-α szerepét igazolták a térfogatérzékeny Cl⁻-csatornák aktiválásában és az RVD-reakciókban. A kísérleti adatok azt mutatják, hogy a PKC-α gátlása – akár kémiai blokkolókkal, akár izoform-specifikus antitestekkel – jelentősen rontja ezeknek a csatornáknak a működését, ami a sejtek hosszan tartó duzzadásához és a RVD zavarához vezet. Ez aláhúzza a PKC-α szerepét szabályozó tényezőként az HT-3 sejtek hipotóniás stresszre adott válaszában.

Ezen felül kimutatták, hogy a citoszkeleton integritása – különösen az aktinfilamentumoké és a mikrotubulusoké – elengedhetetlen a Cl⁻-csatornák megfelelő aktiválásához és a HT-3-sejtek hatékony térfogat-szabályozásához. Az aktinfilamentumok olyan szerekkel történő megzavarása, mint a citochalazin B, fokozza a Cl⁻-vezetőképességet és befolyásolja a sejt térfogatának helyreállását, míg a stabilizáló szerek, például a falloidin, gátolják ezeknek a csatornáknak a tevékenységét és késleltetik az RVD-t. A mikrotubulusokat moduláló vegyületek, például a kolchicin és a taxol, eltérő hatást fejtenek ki, ami rávilágít a citoszkeleton szerkezetei és az ioncsatornák működése közötti komplex kölcsönhatásra ezekben a ráksejtekben.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban