HT-3

HT-3 je lidská buněčná linie rakoviny děložního čípku odvozená od dlaždicobuněčného karcinomu, která se vyznačuje negativním nálezem HPV. Tato buněčná linie se široce využívá ve studiích zaměřených na buněčnou fyziologii, zejména v souvislosti s regulací iontových kanálů, signální transdukcí a úlohou dynamiky cytoskeletu v buněčných procesech. Buňky HT-3 vykazují aktivaci objemově citlivých chloridových (Cl⁻) kanálů, které jsou klíčové pro jejich reakce v podobě regulačního poklesu objemu (RVD) při osmotickém stresu. Tento mechanismus je klíčový pro udržení buněčné homeostázy, protože umožňuje výtok iontů Cl⁻ a K⁺, čímž usnadňuje odtok vody z buňky a obnovuje tak normální objem po otoku.

Výzkum buněčné linie HT-3 poukázal na zapojení specifických izoforem protein kinázy C (PKC) do regulace objemu. Zejména PKC-α byla spojována s aktivací objemově citlivých Cl⁻ kanálů a reakcí RVD. Experimentální data ukazují, že inhibice PKC-α, ať už pomocí chemických blokátorů nebo protilátek specifických pro danou izoformu, významně narušuje funkci těchto kanálů, což vede k prodlouženému bobtnání buněk a narušení RVD. To podtrhuje roli PKC-α jako regulačního faktoru v reakci buněk HT-3 na hypotonický stres.

Kromě toho bylo prokázáno, že integrita cytoskeletu, zejména aktinových filamentů a mikrotubulů, je nezbytná pro správnou aktivaci Cl⁻ kanálů a účinnou regulaci objemu v buňkách HT-3. Narušení aktinových filamentů látkami, jako je cytochalasin B, zvyšuje vodivost Cl⁻ a ovlivňuje obnovení objemu buněk, zatímco stabilizační látky, jako je faloidin, inhibují aktivitu těchto kanálů a oddalují RVD. Sloučeniny modulující mikrotubuly, jako je kolchicin a taxol, mají rozdílné účinky, což zdůrazňuje komplexní vzájemné působení mezi strukturami cytoskeletu a funkcí iontových kanálů v těchto rakovinných buňkách.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení