Pereiti prie turinio
B-LCL-CDG7
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Įgimti glikozilinimo sutrikimai

Dokumentai

B-LCL-CDG7

Cell line · Prekės numeris 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas
B-LCL-CDG7 yra EBV transformuota B limfocitų ląstelių linija, gauta iš CDAII sergančio berniuko. CDAII yra reta genetinė anemija, priklausanti CDG glikozilinimo sutrikimų grupei. CDAII pacientams būdingas COPII komponento SEC23B geno defektas, kuris dalyvauja viduląstelinėje baltymų pernešimo sistemoje (ypač vezikuliniame pumpuriavime iš ER). Atitinkamas pacientas yra homozigotinis dėl šio geno mutacijos. Eritrocitų membranų 3 juostos glikoproteinas yra nepakankamai glikozilintas dėl glikozilinimo aberacijos glikozilinant glikoproteinų polilaktozamino motyvus, bet ne glikofingolipidus, todėl CDA II eritrocitų 3 juosta turi sutrumpintų hibridinio tipo oligosacharidų. Tai rodo papildomą Golgio glikozilinimo fermentų Beta-manozidazės II arba Nacetilgliukozaminiltransferazės II defektą.
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Įgimti glikozilinimo sutrikimai
Paraiškos
CDG poveikio imuninėms ląstelėms genotipavimas, funkciniai tyrimai (pvz., B ląstelių paviršiaus antigenų), citotoksinių vaistų tyrimai, mutacijų analizė, apoptozės mechanizmų analizė, HLA tipo nustatymas, skirtingų ląstelių glikoproteinų glikozilinimo defektų poveikis įvairioms funkcijoms.

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Apvalios ląstelės
Ląstelių tipas
B limfocitas

04Identifikatoriai

Nuoroda
B-LCL-CDG7 (Cytion katalogo numeris 302018)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y3

05Išraiška ir jautrumas

Paviršiaus antigenai
CD15 (Lewis x)(+), CD15s (sialiliuotas Lewis x)-, CD75s (sialiliuoti laktozaminil noligoscharidai)+, CD173 (H kraujo grupė)-, CD174 (Lewis y kraujo grupė)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialiliuotas Tn)-, CD176 (TF)+
Antigeno ekspresija
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC I klasės+, MHC II klasės (HLA-DR)+
Virusai
Transformantas: EBV

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % termiškai inaktyvuoto FBS
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 2 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 1 x 105 iki 5 x 105 ląstelių/ml.
Skysčių atnaujinimas
Kai vidutinė spalva tapo geltona
Atkūrimas po atšilimo
Vidutinis
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Vaikas
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių