B-LCL-CDG7
Cell line · Številka izdelka 302018
B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...
Prilagajanje / Priporočila
- B-LCL-CDG7Cell line€800.00
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
01Splošne informacije
- Opis
- B-LCL-CDG7 je z EBV transformirana celična linija limfocitov B, pridobljena od mladega fanta s CDAII. CDAII je redka genetska anemija, ki spada v razred glikozilacijskih motenj CDG. Bolniki s CDAII imajo okvaro v genu SEC23B, ki je sestavni del COPII in je vključen v sistem znotrajceličnega prenosa beljakovin (zlasti vezikularno izločanje iz ER). Bolnik je homozigot za mutacijo tega gena. Glikoprotein Band 3 membran eritrocitov je premalo glikoziliran zaradi aberantne glikozilacije polilaktozaminskih motivov glikoproteinov, ne pa tudi glikofingolipidov, zato ima Band 3 eritrocitov CDA II skrajšane oligosaharide hibridnega tipa. To kaže na dodatno okvaro encimov glikozilacije v Golgijevem glikemičnem sistemu Beta-manozidaze II ali Nacetilglukozaminiltransferaze II.
- Tkivo
- Periferna kri
- Bolezen
- Prirojene motnje glikozilacije
- Uporaba
- Genotipizacija učinkov CDG v imunskih celicah, funkcionalno testiranje (npr. površinski antigeni celic B), testiranje citotoksičnih zdravil, mutacijska analiza, analiza apoptotičnih mehanizmov, tipizacija HLA, vpliv pomanjkljive glikozilacije različnih celičnih glikoproteinov na različne funkcije.
02Razvrstitev
- Organizem
- Človek
- Seks
- Moški
- Lastnosti rasti
- Vzmetenje
- Stopnja biološke varnosti
- 2
03Značilnosti
- Morfologija
- Okrogle celice
- Vrsta celice
- Limfocit B
04Identifikatorji
- Navajanje vira
- B-LCL-CDG7 (kataloška številka Cytion 302018)
- Davčna identifikacijska številka NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y3
05Izražanje in dovzetnost
- Površinski antigeni
- CD15 (Lewis x)(+), CD15s (sialilirani Lewis x)-, CD75s (sialilirani laktozaminililni noligosharidi)+, CD173 (krvna skupina H)-, CD174 (krvna skupina Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialilirani Tn)-, CD176 (TF)+
- Ekspresija antigena
- CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC razreda I+, MHC razreda II (HLA-DR)+
- Virusi
- Transformant: EBV
06Ravnanje in gojenje
- Gojišče
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
- Inkubacijska atmosfera
37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.
- Prehranska dopolnila
- Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS
- Preusmeritev v drugo kulturo
- Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 2 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 1 x 105 do 5 x 105 celic/ml.
- Obnova tekočine
- Ko se srednja barva spremeni v rumeno
- Obnova po odtaljevanju
- Srednja
- Odtaljevanje in gojenje
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kakovosti in krioprezervacija
- Sterilnost
Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.
Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.
- Medij za zamrzovanje
- Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
- Pogoji shranjevanja
Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.
- Pogoji dostave
Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.
08Donator
- Starost darovalca
- Otrok
- Etnična pripadnost
- Kavkaški
09Pravne zadeve in varnost
- Varnostni ukrepi
- Pri načrtovanju shranjevanja kriovialov v tekočem dušiku za kasnejše odtaljevanje je treba obvezno upoštevati stroge varnostne ukrepe. Nujni so ustrezne zaščitne rokavice in oblačila, med prenosom zamrznjenih vzorcev v rezervoar s tekočim dušikom ali iz njega pa je potrebna uporaba obrazne maske ali zaščitnih očal. S tem se zmanjša tveganje poškodb zaradi morebitnih eksplozij kriovialov pri odstranjevanju, ki lahko povzročijo izstrelitev ostrih delcev.
- Garancija
V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka
Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo
- Potreben je sporazum o prenosu materiala
- Da