الانتقال إلى المحتوى
B-LCL-CDG7
الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
اضطرابات الجليكوزيل الخلقية

المستندات

B-LCL-CDG7

Cell line · رقم المنتج 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف
B-LCL-CDG7 هو سلالة خلايا لمفاوية بائية محوّلة بفيروس إيبفوس مشتقة من صبي صغير مصاب بفقر الدم الليمفاوي CDAII. CDAII هو فقر دم وراثي نادر، ينتمي إلى فئة اضطرابات الغليكوزيل CDG. يعاني مرضى CDAII من خلل في الجين SEC23B المكون لـ COPII والذي يشارك في نظام نقل البروتين داخل الخلايا (خاصةً التبرعم الحويصلي من ER). المريض المعني متماثل الزيجوت للطفرة في هذا الجين. يكون البروتين السكري للنطاق 3 من أغشية كرات الدم الحمراء تحت الغليكوزيل عن طريق الغليكوزيل الشاذ في البروتينات السكرية في أغشية كرات الدم الحمراء عن طريق الغليكوزيل الشاذة في البروتينات السكرية وليس في الغليكوزيلينوليبيدات السكرية، وبالتالي فإن النطاق 3 من كرات الدم الحمراء CDA II يحتوي على سكريات قليلة التهجين من النوع الهجين المقطوع. وهذا يشير إلى وجود خلل إضافي في إنزيمات الغليكوزيل في جولجي إنزيمات بيتا مانوسيداز الثاني أو ناسيتيل جلوكوزامينيل ترانسفيراز الثاني.
الأنسجة
الدم المحيطي
المرض
اضطرابات الجليكوزيل الخلقية
التطبيقات
التنميط الوراثي لتأثيرات البروتينات السمية الخلوية في الخلايا المناعية، والاختبار الوظيفي (مثل مستضدات سطح الخلايا البائية)، واختبار الأدوية السامة للخلايا، والتحليل الطفراتي، وتحليل آليات موت الخلايا المبرمجة، وتحديد نمط مستضدات الخلايا البائية، وتأثير خلل في الغليكوزيلين في البروتينات السكرية الخلوية المتميزة على وظائف متنوعة.

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
2

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية
نوع الخلية
الخلايا اللمفاوية ب

04المعرّفات

المرجع
B-LCL-CDG7 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 302018)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_A9Y3

05التعبير والقابلية للإصابة

المستضدات السطحية
CD15 (لويس إكس) (+)، CD15s (سياليل لويس إكس)-، CD75s (سياليل لاكتوزامينيل نوليغوسكشاريدس)+، CD173 (فصيلة الدم H)-، CD174 (فصيلة الدم لويس ذ)-، CD175 (تن)-، CD175s (سياليل تن)-، CD176 (تن)+
التعبير عن المستضد
CD19+، CD20+، CD37+، CD43+، CD44+، CD45+، CD45R0- CDHC من الفئة الأولى+، CD43+، CD44+، CD45R0- CD45R0- الفئة الأولى+، MHC من الفئة الثانية (HLA-DR)+
الفيروسات
المتحول: فيروس الورم الحليمي البشري

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
إضافة 10% من FBS المعطل بالحرارة إلى الوسط
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 2 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 1 × 105 إلى 5 × 105 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
تجديد السوائل
بمجرد أن يتحول اللون المتوسط إلى الأصفر
التعافي بعد ذوبان الجليد
متوسط
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الطفل
الأصل العرقي
قوقازي