Gå til innholdet
B-LCL-CDG7
Vev
Perifert blod
Sykdom
Medfødte glykosyleringsforstyrrelser

Dokumenter

B-LCL-CDG7

Cell line · Produktnummer 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse
B-LCL-CDG7 er en EBV-transformert B-lymfocyttcellelinje som stammer fra en ung gutt med CDAII. CDAII er en sjelden genetisk anemi som tilhører klassen av CDG-glykosyleringsforstyrrelser. CDAII-pasienter har en defekt i COPII-komponenten SEC23B-genet, som er involvert i det intracellulære proteintransportsystemet (særlig vesikulær knoppdannelse fra ER). Den aktuelle pasienten er homozygot for mutasjonen i dette genet. Bånd 3-glykoprotein i erytrocyttmembraner er underglykosylert ved avvikende glykosylering av polylaktosaminmotiver i glykoproteiner, men ikke av glykosfingolipider, slik at bånd 3 i CDA II-erytrocytter har avkortede oligosakkarider av hybridtypen. Dette tyder på en tilleggsdefekt i Golgi-glykosyleringsenzymer som beta-mannosidase II eller nacetylglukosaminyltransferase II.
Vev
Perifert blod
Sykdom
Medfødte glykosyleringsforstyrrelser
Søknader
Genotyping av CDG-effekter i immunceller, funksjonell testing (f.eks. B-celleoverflateantigener), testing av cytotoksiske legemidler, mutasjonsanalyse, analyse av apoptotiske mekanismer, HLA-typing, innvirkning av defekt glykosylering av forskjellige cellulære glykoproteiner på ulike funksjoner.

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler
Celletype
B-lymfocytt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
B-LCL-CDG7 (Cytion katalognummer 302018)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y3

05Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
CD15 (Lewis x)(+), CD15s (sialylert Lewis x)-, CD75s (sialylert laktosaminyl-noligosakkarider)+, CD173 (blodgruppe H)-, CD174 (blodgruppe Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialylert Tn)-, CD176 (TF)+
Antigenuttrykk
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC klasse I+, MHC klasse II (HLA-DR)+
Virus
Transformant: EBV

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % varmeinaktivert FBS
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 2 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 1 x 105 til 5 x 105 celler/ml for optimal vekst.
Væskefornyelse
Når mellomfargen ble gul
Gjenoppretting etter tining
Medium
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Barn
Etnisitet
Kaukasisk