B-LCL-CDG7
Cell line · Číslo výrobku 302018
B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...
Prispôsobenie / Odporúčania
- B-LCL-CDG7Cell line€800.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
- B-LCL-CDG7 je línia B lymfocytov transformovaná EBV, získaná od mladého chlapca s CDAII. CDAII je zriedkavá genetická anémia, ktorá patrí do skupiny porúch glykozylácie CDG. Pacienti s CDAII majú defekt v géne SEC23B, ktorý sa podieľa na systéme vnútrobunkového transportu proteínov (najmä vezikulárneho pučania z ER). Príslušný pacient je homozygotný pre mutáciu v tomto géne. Pás 3 glykoproteínu membrán erytrocytov je nedostatočne glykozylovaný aberantnou glykozyláciou polylaktozamínových motívov glykoproteínov, ale nie glykosfingolipidov, preto má pás 3 erytrocytov CDA II skrátené oligosacharidy hybridného typu. To poukazuje na ďalší defekt v Golgiho glykozylačných enzýmoch beta-manozidáze II alebo Nacetylglukozaminltransferáze II.
- Tkanivo
- Periférna krv
- Choroba
- Vrodené poruchy glykozylácie
- Aplikácie
- Genotypizácia účinkov CDG v imunitných bunkách, funkčné testovanie (napr. povrchových antigénov B buniek), testovanie cytotoxických liekov, mutačná analýza, analýza apoptotických mechanizmov, typizácia HLA, vplyv defektnej glykozylácie rôznych bunkových glykoproteínov na rôzne funkcie.
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Muž
- Rastové vlastnosti
- Zavesenie
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 2
03Charakteristiky
- Morfológia
- Okrúhle bunky
- Typ bunky
- B lymfocyty
04Identifikátory
- Citácia
- B-LCL-CDG7 (katalógové číslo Cytion 302018)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_A9Y3
05Prejav a náchylnosť
- Povrchové antigény
- CD15 (Lewis x)(+), CD15s (sialylovaný Lewis x)-, CD75s (sialylované laktosaminyl-noligoscharidy)+, CD173 (krvná skupina H)-, CD174 (krvná skupina Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (sialylovaný Tn)-, CD176 (TF)+
- Expresia antigénu
- CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC triedy I+, MHC triedy II (HLA-DR)+
- Vírusy
- Transformant: EBV
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % tepelne inaktivovaného FBS
- Rozmnožovanie kultúr
- Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 2 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 1 x 105 až 5 x 105 buniek/ml.
- Obnova kvapaliny
- Keď sa stredná farba zmení na žltú
- Zotavenie po rozmrazení
- Stredné
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- Dieťa
- Etnická príslušnosť
- Kaukazský
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno