Ir al contenido
B-LCL-CDG7
Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Trastornos congénitos de la glicosilación

Documentos

B-LCL-CDG7

Cell line · Número de producto 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00sin impuestos ni gastos de envío

Personalización / Recomendaciones

En stock
Lote
Recomendado (lote más fresco)
1

01Información general

Descripción
B-LCL-CDG7 es una línea celular de linfocitos B transformados por el VEB derivada de un joven con CDAII. La CDAII es una anemia genética rara, afiliada a la clase de trastornos de la glucosilación CDG. Los pacientes con CDAII presentan un defecto en el gen SEC23B, componente del COPII, que interviene en el sistema de transporte intracelular de proteínas (en particular, el brote vesicular a partir del RE). El paciente correspondiente es homocigoto para la mutación en este gen. La glicoproteína de banda 3 de las membranas eritrocitarias está infraglucosilada por glicosilación aberrante de los motivos de polilactosamina de las glicoproteínas, pero no de los glicoesfingolípidos, por lo que la banda 3 de los eritrocitos CDA II tiene oligosacáridos truncados de tipo híbrido. Esto apunta a un defecto adicional en las enzimas de glicosilación del Golgi Beta-mannosidasa II o Nacetilglucosaminiltransferasa II.
Pañuelo de papel
Sangre periférica
Enfermedad
Trastornos congénitos de la glicosilación
Aplicaciones
Genotipado de efectos CDG en células inmunitarias, pruebas funcionales (por ejemplo, antígenos de superficie de células B), pruebas de fármacos citotóxicos, análisis mutacional, análisis de mecanismos apoptóticos, tipificación HLA, impacto de la glicosilación defectuosa de distintas glicoproteínas celulares en diversas funciones.

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Células redondas
Tipo de célula
Linfocito B

04Identificadores

Referencia
B-LCL-CDG7 (número de catálogo de Cytion 302018)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y3

05Expresión y susceptibilidad

Antígenos de superficie
CD15 (Lewis x)(+), CD15s (Lewis x sialilado)-, CD75s (Noligoscáridos lactosaminilados sialilados)+, CD173 (grupo sanguíneo H)-, CD174 (grupo sanguíneo Lewis y)-, CD175 (Tn)-, CD175s (Tn sialilado)-, CD176 (TF)+
Expresión de antígenos
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC Clase.I+, MHC Clase II (HLA-DR)+
Virus
Transformante: VEB

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS inactivado por calor
Subcultivo
Mantenga los cultivos añadiendo o sustituyendo periódicamente el medio. Inicie los cultivos con una densidad de 2 x 105 células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 1 x 105 a 5 x 105 células/ml para un crecimiento óptimo.
Renovación de fluidos
Una vez que el color medio se convirtió en amarillo
Recuperación tras la descongelación
Medio
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Niño
Origen étnico
Caucásico