Langsung ke isi
B-LCL-CDG7
Tisu
Darah tepi
Penyakit
Gangguan Bawaan Glikosilasi

Dokumen

B-LCL-CDG7

Cell line · Nomor produk 302018

B-LCL-CDG7 is an EBV-transformed B lymphocyte cell line derived from a young boy with CDAII. CDAII is a rare genetic anaemia, affiliated to the class of CDG ...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi
B-LCL-CDG7 adalah garis sel limfosit B yang ditransformasi EBV yang berasal dari seorang anak laki-laki dengan CDAII. CDAII adalah anemia genetik yang langka, yang berafiliasi dengan kelas kelainan glikosilasi CDG. Pasien CDAII memiliki cacat pada komponen COPII gen SEC23B yang terlibat dalam sistem transpor protein intraseluler (khususnya tunas vesikular dari ER). Pasien yang bersangkutan adalah homozigot untuk mutasi pada gen ini. Pita 3 glikoprotein membran eritrosit mengalami glikosilasi oleh glikosilasi yang menyimpang dari motif polilaktosamin glikoprotein tetapi tidak glikosfingolipid, sehingga pita 3 eritrosit CDA II memiliki oligosakarida tipe hibrida yang terpotong. Hal ini menunjukkan adanya cacat tambahan pada enzim glikosilasi Golgi Beta-mannosidase II atau Nacetylglucosaminyltransferase II.
Tisu
Darah tepi
Penyakit
Gangguan Bawaan Glikosilasi
Aplikasi
Genotipe efek CDG pada sel imun, pengujian fungsional (misalnya antigen permukaan sel B), pengujian obat sitotoksik, analisis mutasi, analisis mekanisme apoptosis, pengetikan HLA, dampak glikosilasi glikoprotein seluler yang berbeda pada beragam fungsi.

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Penangguhan
Tingkat keamanan hayati
2

03Karakteristik

Morfologi
Sel bulat
Jenis sel
Limfosit B

04Pengidentifikasi

Referensi
B-LCL-CDG7 (Nomor katalog Cytion 302018)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_A9Y3

05Ekspresi dan kerentanan

Antigen permukaan
CD15 (Lewis x) (+), CD15s (Lewis x tersialilasi) -, CD75s (laktosaminil Noligosakarida tersialilasi) +, CD173 (golongan darah H) -, CD174 (golongan darah Lewis y) -, CD175 (Tn) -, CD175s (Tn tersialilasi) -, CD176 (TF) +
Ekspresi antigen
CD19+, CD20+, CD37+, CD43+, CD44+, CD45+, CD45R0-MHC Kelas.I+, MHC Kelas II (HLA-DR)+
Virus
Transformant: EBV

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS yang dinonaktifkan dengan panas
Perbanyakan sel
Pertahankan kultur dengan secara berkala menambahkan atau mengganti medium. Mulailah kultur dengan kepadatan 2 x 10⁵ sel/ml dan jaga konsentrasi sel dalam rentang 1 x 10⁵ hingga 5 x 10⁵ sel/ml untuk pertumbuhan optimal.
Pergantian cairan
Setelah warna medium berubah menjadi kuning
Pemulihan pasca-pencairan
Sedang
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Anak
Etnis
Kaukasia