Pereiti prie turinio
DH82
Liga
Šunų histiocitinis sarkomas
Sinonimai
DH-82, DH 82

Dokumentai

DH82

Cell line · Prekės numeris 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

DH-82 ląstelės, gautos iš dešimties metų auksaspalvio retriverio patino piktybinės histiocitozės, yra kertinis akmuo tiriant šunų imunologiją ir susijusias ligas.

Šios ląstelės pasižymi į makrofagus panašia morfologija, atspindinčia pagrindines žmogaus makrofagų funkcijas, todėl yra tinkamas modelis įvairiems šunų sveikatos aspektams, ypač su imunine sistema susijusioms ligoms, tirti.

DH-82 ląstelės pasižymi gebėjimu fagocituoti latekso daleles, o tai yra esminė makrofagų, atsakingų už svetimų medžiagų pašalinimą iš organizmo, funkcija. Dėl šios savybės DH-82 ląstelės yra patikima priemonė, leidžianti tirti šunų imunines reakcijas, ypač infekcijų ir uždegiminių ligų atveju. Fc gama receptorių raiška DH-82 ląstelėse yra išskirtinis bruožas.

Šie receptoriai yra neatsiejami nuo imuninių reakcijų, nes jie jungiasi su antikūnais ir palengvina antikūnais padengtų patogenų ar dalelių fagocitozę. Dėl to DH-82 ląstelės yra ypač vertingos atliekant tyrimus, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama imuninėms reakcijoms ir nuo antikūnų priklausomam ląstelių citotoksiškumui (ADCC). Priešingai, DH-82 ląstelės neišreiškia Fc mu ir C3b receptorių.

Kadangi nėra Fc mu receptorių, paprastai randamų B ląstelėse ir dalyvaujančių antigeno pateikime, ir C3b receptorių, kurie imuninio atsako metu jungiasi su komplemento baltymais, tai sudaro kontroliuojamas sąlygas tirti specifinius imuninius mechanizmus, kuriems šie receptoriai gali turėti įtakos.

Be to, DH-82 ląstelės negamina IL-1, kuris yra pagrindinis citokinas uždegiminėse reakcijose. Ši savybė suteikia unikalią perspektyvą tiriant IL-1 vaidmenį įvairiuose biologiniuose procesuose ir suprantant IL-1 sukeltas ligas.

Infekcinių ligų srityje DH-82 ląstelės pasirodė ypač naudingos tiriant šunų monocitinę erlichiozę (CME) - erkių platinamą ligą, kurią sukelia Ehrlichia canis.

Ląstelės sudaro palankią aplinką bakterijai augti, todėl padeda tirti ligos vystymąsi ir galimus gydymo būdus. DH-82 ląstelių padvigubėjimo laikas - maždaug 26 valandos - taip pat yra labai svarbus jų naudojimo aspektas, turintis įtakos eksperimentų planavimui ir rezultatų interpretavimui.

Liga
Šunų histiocitinis sarkomas
Sinonimai
  • DH-82
  • DH 82

02Klasifikacija

Organizmas
Šuo
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į makrofagus panašus
Ląstelių tipas
Histiocitai

04Identifikatoriai

Nuoroda
DH82 (Cytion katalogo numeris 305003)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
Auksaspalvis retriveris
Donoro amžius
10 metų