Preskoči na vsebino
DH82
Bolezen
Pasji histiocitni sarkom
Sinonimi
DH-82, DH 82

Dokumenti

DH82

Cell line · Številka izdelka 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celice DH-82, pridobljene iz maligne histiocitozne bolezni desetletnega samca zlatega retrierja, so temeljni kamen pri preučevanju pasje imunologije in z njo povezanih bolezni.

Te celice imajo makrofagom podobno morfologijo, ki odraža ključne funkcije človeških makrofagov, s čimer zagotavljajo ustrezen model za preučevanje različnih vidikov zdravja psov, zlasti bolezni, povezanih z imunskim sistemom.

Značilnost celic DH-82 je njihova sposobnost fagocitizacije delcev lateksa, kar je bistvena funkcija makrofagov, odgovornih za odstranjevanje tujih snovi v telesu. Zaradi te lastnosti so celice DH-82 zanesljivo orodje za raziskovanje imunskih odzivov psov, zlasti pri okužbah in vnetnih boleznih. Pomembna lastnost celic DH-82 je izražanje receptorjev Fc gama.

Ti receptorji so sestavni del imunskih odzivov, saj se vežejo na protitelesa in olajšajo fagocitozo s protitelesi prevlečenih patogenov ali delcev. Zato so celice DH-82 še posebej dragocene v študijah, ki se osredotočajo na imunske odzive in od protiteles odvisno celično citotoksičnost (ADCC). Nasprotno pa celice DH-82 ne izražajo receptorjev Fc mu in C3b.

Odsotnost receptorjev Fc mu, ki jih običajno najdemo na celicah B in sodelujejo pri predstavitvi antigenov, in receptorjev C3b, ki se v imunskih odzivih vežejo na beljakovine komplementa, zagotavlja nadzorovano okolje za preučevanje posebnih imunskih mehanizmov, na katere lahko ti receptorji vplivajo.

Poleg tega celice DH-82 ne proizvajajo IL-1, ključnega citokina v vnetnih odzivih. Ta lastnost ponuja edinstveno perspektivo za raziskovanje vloge IL-1 v različnih bioloških procesih in razumevanje bolezni, ki jih IL-1 posreduje.

Na področju nalezljivih bolezni so se celice DH-82 izkazale za posebej uporabne pri preučevanju pasje monocitne erlihioze (CME), bolezni, ki jo prenašajo klopi in jo povzroča Ehrlichia canis.

Celice zagotavljajo ugodno okolje za rast bakterije, kar pomaga pri raziskovanju razvoja bolezni in možnih načinov zdravljenja. Čas podvojitve celic DH-82, ki znaša približno 26 ur, je prav tako kritičen vidik pri njihovi uporabi, saj vpliva na načrtovanje poskusov in razlago rezultatov.

Bolezen
Pasji histiocitni sarkom
Sinonimi
  • DH-82
  • DH 82

02Razvrstitev

Organizem
Pes
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Makrofagom podobni
Vrsta celice
Histiociti

04Identifikatorji

Navajanje vira
DH82 (kataloška številka Cytion 305003)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Pasma / podvrsta
Zlati prinašalec
Starost darovalca
10 let