Mine otse sisu juurde
DH82
Haigus
Koerte histotsütaarne sarkom
Sünonüümid
DH-82, DH 82

Dokumendid

DH82

Cell line · Toote number 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DH-82 rakud, mis on saadud kümneaastase isase kuldse retriiveri pahaloomulisest histiotsütoosist, on nurgakivi koerte immunoloogia ja sellega seotud haiguste uurimisel.

Neil rakkudel on makrofaagilaadne morfoloogia, mis peegeldab inimese makrofaagide põhifunktsioone, pakkudes seega asjakohast mudelit koerte tervise erinevate aspektide, eelkõige immuunsüsteemiga seotud seisundite uurimiseks.

DH-82 rakkude iseloomulikuks tunnuseks on nende võime fagotsüdeerida lateksiosakesi, mis on makrofaagide oluline funktsioon, mis vastutab võõrkehade kõrvaldamise eest organismis. See omadus asetab DH-82 rakud tugevaks vahendiks koerte immuunvastuse uurimisel, eriti infektsioonide ja põletikuliste haiguste puhul. Tähelepanuväärne omadus on Fc gamma retseptorite ekspressioon DH-82 rakkudes.

Need retseptorid on immuunvastuse lahutamatu osa, kuna nad seonduvad antikehadega ja hõlbustavad antikehadega kaetud patogeenide või osakeste fagotsütoosi. See muudab DH-82 rakud eriti väärtuslikuks uuringutes, mis keskenduvad immuunvastusele ja antikehasõltuvale rakulisele tsütotoksilisusele (ADCC). Seevastu DH-82 rakud ei ekspresseeri Fc mu ja C3b retseptoreid.

Fc mu retseptorite, mis tavaliselt leidub B-rakkudel ja osalevad antigeeni esitlemisel, ja C3b retseptorite, mis seonduvad komplemendi valkudega immuunvastuses, puudumine annab kontrollitud tingimused konkreetsete immuunmehhanismide uurimiseks, mida need retseptorid võivad mõjutada.

Lisaks sellele ei tooda DH-82 rakud IL-1, mis on põletikulise reaktsiooni võtmetähtsusega tsütokiin. See omadus pakub ainulaadset perspektiivi IL-1 rolli uurimiseks erinevates bioloogilistes protsessides ja IL-1 vahendatud haiguste mõistmiseks.

Nakkushaiguste valdkonnas on DH-82 rakud osutunud eriti kasulikuks koerte monotsüütilise ehrlichioosi (CME), Ehrlichia canis'e poolt põhjustatud puugihaiguse uurimisel.

Rakud pakuvad bakteri kasvuks soodsat keskkonda, mis aitab uurida haiguse arengut ja võimalikke ravimeetodeid. DH-82 rakkude kahekordistumisaeg, ligikaudu 26 tundi, on samuti kriitiline aspekt nende kasutamisel, mõjutades katsete kavandamist ja tulemuste tõlgendamist.

Haigus
Koerte histotsütaarne sarkom
Sünonüümid
  • DH-82
  • DH 82

02Klassifikatsioon

Organism
Koer
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Makrofaagilaadsed
Rakutüüp
Histotsüüdid

04Tunnused

Viide
DH82 (Cytioni katalooginumber 305003)
NCBI maksukood
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
Kuldne retriiver
Doonori vanus
10 aastat