Přejít na obsah
DH82
Nemoc
Histiocytární sarkom psů
Synonyma
DH-82, DH 82

Dokumenty

DH82

Cell line · Číslo výrobku 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buňky DH-82, získané z maligní histiocytózy desetiletého samce zlatého retrívra, jsou základem studia psí imunologie a souvisejících onemocnění.

Tyto buňky vykazují morfologii podobnou makrofágům a odrážejí klíčové funkce lidských makrofágů, čímž poskytují vhodný model pro zkoumání různých aspektů zdraví psů, zejména stavů souvisejících s imunitním systémem.

Charakteristickou vlastností buněk DH-82 je jejich schopnost fagocytovat latexové částice, což je základní funkce makrofágů odpovědných za odstraňování cizorodých látek v těle. Tato vlastnost staví buňky DH-82 do role spolehlivého nástroje pro zkoumání imunitních reakcí psů, zejména v souvislosti s infekcemi a zánětlivými onemocněními. Pozoruhodnou vlastností buněk DH-82 je exprese receptorů Fc gama.

Tyto receptory jsou nedílnou součástí imunitních reakcí, protože se vážou na protilátky a usnadňují fagocytózu patogenů nebo částic obalených protilátkami. Díky tomu jsou buňky DH-82 zvláště cenné ve studiích zaměřených na imunitní reakce a buněčnou cytotoxicitu závislou na protilátkách (ADCC). Naproti tomu buňky DH-82 neexprimují receptory Fc mu a C3b.

Nepřítomnost receptorů Fc mu, které se obvykle nacházejí na buňkách B a podílejí se na prezentaci antigenů, a receptorů C3b, které se v imunitních reakcích vážou na proteiny komplementu, poskytuje kontrolované prostředí pro zkoumání specifických imunitních mechanismů, které mohou být těmito receptory ovlivněny.

Buňky DH-82 navíc neprodukují IL-1, klíčový cytokin v zánětlivých reakcích. Tato vlastnost nabízí jedinečnou perspektivu pro zkoumání úlohy IL-1 v různých biologických procesech a pochopení nemocí zprostředkovaných IL-1.

V oblasti infekčních onemocnění se buňky DH-82 ukázaly jako zvláště užitečné při studiu psí monocytární ehrlichiózy (CME), onemocnění přenášeného klíšťaty, které způsobuje Ehrlichia canis.

Buňky poskytují příznivé prostředí pro růst bakterie, což napomáhá zkoumání vývoje onemocnění a potenciální léčby. Doba zdvojení buněk DH-82, přibližně 26 hodin, je také kritickým aspektem při jejich použití, což ovlivňuje návrh experimentů a interpretaci výsledků.

Nemoc
Histiocytární sarkom psů
Synonyma
  • DH-82
  • DH 82

02Klasifikace

Organismus
Pes
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Makrofágům podobné
Typ buňky
Histiocyty

04Identifikátory

Citace
DH82 (katalogové číslo Cytion 305003)
Daňové identifikační číslo NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
Zlatý retrívr
Věk dárce
10 let