Gå til innholdet
DH82
Sykdom
Histiocytært sarkom hos hund
Synonymer
DH-82, DH 82

Dokumenter

DH82

Cell line · Produktnummer 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

DH-82-celler, som stammer fra malign histiocytose hos en ti år gammel golden retriever-hann, er en hjørnestein i studiet av immunologi og relaterte sykdommer hos hunder.

Disse cellene har en makrofaglignende morfologi som gjenspeiler de viktigste funksjonene til humane makrofager, og er dermed en relevant modell for å undersøke ulike aspekter ved hundens helse, særlig immunsystemrelaterte tilstander.

Et kjennetegn ved DH-82-cellene er deres evne til å fagocytere lateks-partikler, en viktig funksjon hos makrofager som er ansvarlige for eliminering av fremmede stoffer i kroppen. Denne egenskapen gjør DH-82-celler til et robust verktøy for å undersøke immunresponsen hos hunder, spesielt i forbindelse med infeksjoner og inflammatoriske sykdommer. Uttrykket av Fc-gamma-reseptorer i DH-82-celler er et bemerkelsesverdig trekk.

Disse reseptorene er en viktig del av immunresponsen, ettersom de binder seg til antistoffer og letter fagocytose av antistoffbelagte patogener eller partikler. Dette gjør DH-82-celler spesielt verdifulle i studier som fokuserer på immunresponser og antistoffavhengig cellulær cytotoksisitet (ADCC). DH-82-celler uttrykker derimot ikke Fc mu- og C3b-reseptorer.

Fraværet av Fc mu-reseptorer, som vanligvis finnes på B-celler og er involvert i antigenpresentasjon, og C3b-reseptorer, som binder seg til komplementproteiner i immunresponser, gir en kontrollert setting for å undersøke spesifikke immunmekanismer som kan påvirkes av disse reseptorene.

I tillegg produserer DH-82-celler ikke IL-1, et sentralt cytokin i inflammatoriske responser. Dette gir et unikt perspektiv for å undersøke IL-1s rolle i ulike biologiske prosesser og forstå IL-1-medierte sykdommer.

Når det gjelder infeksjonssykdommer, har DH-82-celler vist seg å være spesielt nyttige i studier av monocytisk ehrlichiose hos hund (CME), en flåttbåren sykdom forårsaket av Ehrlichia canis.

Cellene gir et gunstig miljø for bakteriens vekst, noe som bidrar til utforskningen av sykdommens utvikling og potensielle behandlinger. DH-82-cellenes fordoblingstid på ca. 26 timer er også et kritisk aspekt ved bruken av dem, noe som påvirker forsøksdesignet og tolkningen av resultatene.

Sykdom
Histiocytært sarkom hos hund
Synonymer
  • DH-82
  • DH 82

02Klassifisering

Organisme
Hund
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Makrofaglignende
Celletype
Histiocytt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
DH82 (Cytion-katalognummer 305003)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Rase / underart
Golden Retriever
Donorens alder
10 år