Gå direkt till innehållet
DH82
Sjukdom
Histiocytärt sarkom hos hund
Synonymer
DH-82, DH 82

DH82

Cell line · Produktnummer 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

DH-82-celler, som härrör från malign histiocytos hos en tioårig Golden Retriever-hane, är en hörnsten i studierna av immunologi och relaterade sjukdomar hos hundar.

Dessa celler uppvisar en makrofagliknande morfologi som speglar de viktigaste funktionerna hos mänskliga makrofager och utgör därmed en relevant modell för att undersöka olika aspekter av hundars hälsa, särskilt immunsystemrelaterade tillstånd.

En utmärkande egenskap hos DH-82-cellerna är deras förmåga att fagocytera latexpartiklar, en viktig funktion hos makrofager som ansvarar för eliminering av främmande ämnen i kroppen. Denna egenskap gör DH-82-cellerna till ett robust verktyg för att undersöka immunsvaret hos hundar, särskilt vid infektioner och inflammatoriska sjukdomar. Uttrycket av Fc-gamma-receptorer i DH-82-celler är en anmärkningsvärd egenskap.

Dessa receptorer är en viktig del av immunförsvaret eftersom de binder till antikroppar och underlättar fagocytosen av antikroppsbelagda patogener eller partiklar. Detta gör DH-82-celler särskilt värdefulla i studier som fokuserar på immunsvar och antikroppsberoende cellulär cytotoxicitet (ADCC). DH-82-celler uttrycker däremot inte Fc mu- och C3b-receptorer.

Avsaknaden av Fc mu-receptorer, som vanligtvis finns på B-celler och är involverade i antigenpresentation, och C3b-receptorer, som binder till komplementproteiner i immunsvar, ger en kontrollerad miljö för att undersöka specifika immunmekanismer som kan påverkas av dessa receptorer.

DH-82-cellerna producerar inte heller IL-1, en cytokin som är central för inflammatoriska reaktioner. Detta ger ett unikt perspektiv för att undersöka IL-1:s roll i olika biologiska processer och förstå IL-1-medierade sjukdomar.

När det gäller infektionssjukdomar har DH-82-celler visat sig vara särskilt användbara för att studera monocytär ehrlichios hos hundar (CME), en fästingburen sjukdom som orsakas av Ehrlichia canis.

Cellerna utgör en gynnsam miljö för bakteriens tillväxt, vilket underlättar utforskningen av sjukdomens utveckling och potentiella behandlingar. DH-82-cellernas fördubblingstid, cirka 26 timmar, är också en kritisk aspekt vid användningen av dem och påverkar experimentutformningen och tolkningen av resultaten.

Sjukdom
Histiocytärt sarkom hos hund
Synonymer
  • DH-82
  • DH 82

02Klassificering

Organism
Hund
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Makrofagliknande
Celltyp
Histiocyt

04Identifierare

Källa
DH82 (Cytion katalognummer 305003)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
Golden Retriever
Donatorns ålder
10 år