DH82

As células DH-82, derivadas da histiocitose maligna de um Golden Retriever macho de dez anos de idade, são uma pedra angular no estudo da imunologia canina e das doenças relacionadas.

Estas células apresentam uma morfologia semelhante à dos macrófagos, reflectindo as principais funções dos macrófagos humanos, constituindo assim um modelo relevante para a investigação de vários aspectos da saúde canina, em especial as doenças relacionadas com o sistema imunitário.

Uma caraterística definidora das células DH-82 é a sua capacidade de fagocitar partículas de látex, uma função essencial dos macrófagos responsável pela eliminação de substâncias estranhas ao organismo. Esta propriedade posiciona as células DH-82 como uma ferramenta robusta para investigar as respostas imunitárias dos cães, especialmente face a infecções e doenças inflamatórias. A expressão de receptores Fc gama nas células DH-82 é uma caraterística notável.

Estes receptores fazem parte integrante das respostas imunitárias, uma vez que se ligam a anticorpos e facilitam a fagocitose de agentes patogénicos ou partículas revestidas de anticorpos. Este facto torna as células DH-82 particularmente valiosas em estudos centrados nas respostas imunitárias e na citotoxicidade celular dependente de anticorpos (ADCC). Em contrapartida, as células DH-82 não expressam receptores Fc mu e C3b.

A ausência de receptores Fc mu, que se encontram normalmente nas células B e estão envolvidos na apresentação de antigénios, e de receptores C3b, que se ligam a proteínas do complemento nas respostas imunitárias, proporciona um ambiente controlado para examinar mecanismos imunitários específicos que podem ser influenciados por estes receptores.

Além disso, as células DH-82 não são produtoras de IL-1, uma citocina fundamental nas respostas inflamatórias. Esta caraterística oferece uma perspetiva única para investigar o papel da IL-1 em vários processos biológicos e compreender as doenças mediadas pela IL-1.

No domínio das doenças infecciosas, as células DH-82 revelaram-se particularmente úteis no estudo da erliquiose monocítica canina (EMC), uma doença transmitida por carraças causada pela Ehrlichia canis.

As células proporcionam um ambiente propício ao crescimento da bactéria, ajudando na exploração do desenvolvimento da doença e de potenciais tratamentos. O tempo de duplicação das células DH-82, aproximadamente 26 horas, é também um aspeto crítico na sua utilização, influenciando a conceção experimental e a interpretação dos resultados.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia