DH82
Cell line · Numer produktu 305003
DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...
Dostosowanie / Zalecenia
- DH82Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki DH-82, pochodzące ze złośliwej histiocytozy dziesięcioletniego samca rasy Golden Retriever, są kamieniem węgielnym w badaniach nad immunologią psów i powiązanymi chorobami.
Komórki te wykazują morfologię podobną do makrofagów, odzwierciedlając kluczowe funkcje ludzkich makrofagów, zapewniając w ten sposób odpowiedni model do badania różnych aspektów zdrowia psów, w szczególności stanów związanych z układem odpornościowym.
Cechą charakterystyczną komórek DH-82 jest ich zdolność do fagocytowania cząstek lateksu, co jest podstawową funkcją makrofagów odpowiedzialnych za eliminację obcych substancji w organizmie. Ta właściwość sprawia, że komórki DH-82 są solidnym narzędziem do badania odpowiedzi immunologicznej psów, zwłaszcza w obliczu infekcji i chorób zapalnych. Ekspresja receptorów Fc gamma w komórkach DH-82 jest godną uwagi cechą.
Receptory te są integralną częścią odpowiedzi immunologicznej, ponieważ wiążą się z przeciwciałami i ułatwiają fagocytozę patogenów lub cząstek pokrytych przeciwciałami. Sprawia to, że komórki DH-82 są szczególnie cenne w badaniach skupiających się na odpowiedziach immunologicznych i cytotoksyczności komórkowej zależnej od przeciwciał (ADCC). W przeciwieństwie do nich, komórki DH-82 nie wykazują ekspresji receptorów Fc mu i C3b.
Brak receptorów Fc mu, zwykle występujących na komórkach B i zaangażowanych w prezentację antygenu, oraz receptorów C3b, które wiążą się z białkami dopełniacza w odpowiedziach immunologicznych, zapewnia kontrolowane warunki do badania konkretnych mechanizmów odpornościowych, na które mogą wpływać te receptory.
Dodatkowo, komórki DH-82 nie produkują IL-1, kluczowej cytokiny w odpowiedziach zapalnych. Ta cecha oferuje unikalną perspektywę do badania roli IL-1 w różnych procesach biologicznych i zrozumienia chorób, w których pośredniczy IL-1.
W dziedzinie chorób zakaźnych, komórki DH-82 okazały się szczególnie przydatne w badaniu erlichiozy monocytarnej psów (CME), choroby przenoszonej przez kleszcze wywoływanej przez Ehrlichia canis.
Komórki zapewniają sprzyjające środowisko dla wzrostu bakterii, pomagając w badaniu rozwoju choroby i potencjalnych metod leczenia. Czas podwojenia komórek DH-82, wynoszący około 26 godzin, jest również krytycznym aspektem w ich stosowaniu, wpływając na projektowanie eksperymentów i interpretację wyników.
- Choroba
- Mięsak histiocytarny psów
- Synonimy
- DH-82
- DH 82
02Klasyfikacja
- Organizm
- Pies
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Makrofagi
- Typ komórki
- Histiocyt
04Identyfikatory
- Źródło
- DH82 (numer katalogowy Cytion 305003)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_2018
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Rasa / podgatunek
- Golden Retriever
- Wiek dawcy
- 10 lat
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak
