İçeriğe atla
DH82
Hastalık
Köpek histiyositik sarkomu
Eş anlamlılar
DH-82, DH 82

DH82

Cell line · Ürün numarası 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

On yaşında bir erkek Golden Retriever'ın malign histiyositozundan elde edilen DH-82 hücreleri, köpek immünolojisi ve ilgili hastalıkların incelenmesinde bir köşe taşıdır.

Bu hücreler, insan makrofajlarının temel işlevlerini yansıtan makrofaj benzeri bir morfoloji sergiler ve böylece köpek sağlığının çeşitli yönlerini, özellikle de bağışıklık sistemiyle ilgili koşulları araştırmak için uygun bir model sağlar.

DH-82 hücrelerinin tanımlayıcı bir özelliği, vücuttaki yabancı maddelerin ortadan kaldırılmasından sorumlu makrofajların temel bir işlevi olan lateks partiküllerini fagosite etme kabiliyetleridir. Bu özellik DH-82 hücrelerini, özellikle enfeksiyonlar ve enflamatuar hastalıklar karşısında köpeklerin bağışıklık tepkilerini araştırmak için sağlam bir araç olarak konumlandırmaktadır. DH-82 hücrelerindeki Fc gama reseptörlerinin ifadesi dikkate değer bir özelliktir.

Bu reseptörler, antikorlara bağlandıkları ve antikor kaplı patojenlerin veya partiküllerin fagositozunu kolaylaştırdıkları için bağışıklık tepkilerinin ayrılmaz bir parçasıdır. Bu durum DH-82 hücrelerini bağışıklık tepkileri ve antikora bağlı hücresel sitotoksisiteye (ADCC) odaklanan çalışmalarda özellikle değerli kılmaktadır. Buna karşın, DH-82 hücreleri Fc mu ve C3b reseptörlerini ifade etmez.

Tipik olarak B hücrelerinde bulunan ve antijen sunumunda rol oynayan Fc mu reseptörlerinin ve immün yanıtlarda kompleman proteinlerine bağlanan C3b reseptörlerinin yokluğu, bu reseptörlerden etkilenebilecek spesifik immün mekanizmaları incelemek için kontrollü bir ortam sağlar.

Ayrıca, DH-82 hücreleri enflamatuar yanıtlarda önemli bir sitokin olan IL-1'in üreticisi değildir. Bu özellik, IL-1'in çeşitli biyolojik süreçlerdeki rolünü araştırmak ve IL-1 aracılı hastalıkları anlamak için benzersiz bir bakış açısı sunar.

Bulaşıcı hastalıklar alanında, DH-82 hücrelerinin Ehrlichia canis'in neden olduğu kene kaynaklı bir hastalık olan köpek monositik ehrlichiosis (CME) çalışmasında özellikle yararlı olduğu kanıtlanmıştır.

Hücreler, bakterinin büyümesi için elverişli bir ortam sağlayarak hastalığın gelişiminin ve potansiyel tedavilerin araştırılmasına yardımcı olur. DH-82 hücrelerinin yaklaşık 26 saat olan ikiye katlanma süresi, deneysel tasarımı ve sonuçların yorumlanmasını etkileyerek kullanımlarında kritik bir unsurdur.

Hastalık
Köpek histiyositik sarkomu
Eş anlamlılar
  • DH-82
  • DH 82

02Sınıflandırma

Canlı
Köpek
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Makrofaj benzeri
Hücre türü
Histiyosit

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
DH82 (Cytion katalog numarası 305003)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
Golden Retriever
Bağışçının yaşı
10 yıl