Tartalomra ugrás
DH82
Betegség
Kutyák szövettani szarkoma
Szinonimák
DH-82, DH 82

Dokumentumok

DH82

Cell line · Termékszám 305003

DH-82 cells, derived from the malignant histiocytosis of a ten-year-old male Golden Retriever, are a cornerstone in the study of canine immunology and rel...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A DH-82 sejtek, amelyek egy tízéves Golden Retriever kan rosszindulatú hisztiocitózisából származnak, a kutyaimmunológia és a kapcsolódó betegségek tanulmányozásának sarokkövei.

Ezek a sejtek makrofág-szerű morfológiát mutatnak, tükrözve a humán makrofágok kulcsfontosságú funkcióit, ezáltal releváns modellt biztosítanak a kutyák egészségének különböző aspektusai, különösen az immunrendszerrel kapcsolatos állapotok vizsgálatához.

A DH-82 sejtek egyik meghatározó jellemzője, hogy képesek latex részecskéket fagocitálni, ami a szervezetben lévő idegen anyagok eltávolításáért felelős makrofágok alapvető funkciója. Ez a tulajdonsága a DH-82 sejteket a kutyák immunválaszának feltárására szolgáló robusztus eszközként pozícionálja, különösen a fertőzések és gyulladásos betegségek esetében. A DH-82 sejtek Fc gamma receptorainak expressziója figyelemre méltó tulajdonság.

Ezek a receptorok az immunválaszok szerves részét képezik, mivel kötődnek az antitestekhez és megkönnyítik az antitesttel bevont kórokozók vagy részecskék fagocitózisát. Ez teszi a DH-82 sejteket különösen értékessé az immunválaszokra és az antitestfüggő sejtes citotoxicitásra (ADCC) összpontosító vizsgálatokban. Ezzel szemben a DH-82 sejtek nem expresszálnak Fc mu és C3b receptorokat.

A jellemzően a B-sejteken található és az antigénprezentációban részt vevő Fc mu receptorok és az immunválaszban a komplementfehérjékhez kötődő C3b receptorok hiánya ellenőrzött környezetet biztosít az olyan specifikus immunmechanizmusok vizsgálatához, amelyeket ezek a receptorok befolyásolhatnak.

A DH-82 sejtek emellett nem termelik az IL-1-et, a gyulladásos válaszok egyik kulcsfontosságú citokinjét. Ez a tulajdonság egyedülálló perspektívát kínál az IL-1 különböző biológiai folyamatokban betöltött szerepének vizsgálatához és az IL-1 által közvetített betegségek megértéséhez.

A fertőző betegségek területén a DH-82 sejtek különösen hasznosnak bizonyultak a kutyák monocitikus ehrlichiosisának (CME), az Ehrlichia canis által okozott, kullancsok által terjesztett betegségnek a tanulmányozásában.

A sejtek kedvező környezetet biztosítanak a baktérium növekedéséhez, segítve a betegség kialakulásának és lehetséges kezeléseinek feltárását. A DH-82 sejtek megduplázódási ideje, körülbelül 26 óra, szintén kritikus szempont a felhasználásuk során, ami befolyásolja a kísérleti tervezést és az eredmények értelmezését.

Betegség
Kutyák szövettani szarkoma
Szinonimák
  • DH-82
  • DH 82

02Osztályozás

Organizmus
Kutya
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Makrofág-szerű
Sejttípus
Hisztocita

04Azonosítók

Hivatkozás
DH82 (Cytion katalógusszám: 305003)
NCBI adóazonosító szám
9615
Cellosaurus
CVCL_2018

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
Golden Retriever
Az adományozó életkora
10 év