Pereiti prie turinio
HS-5
Audinys
Kaulų čiulpai, stromos
Liga
Normalus
Sinonimai
HS5

Dokumentai

HS-5

Cell line · Prekės numeris 305451

The HS-5 cell line is a human bone marrow-derived mesenchymal stromal cell (MSC) model commonly used to study the supportive role of stromal cells in hema...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HS-5 ląstelių linija – tai iš žmogaus kaulų čiulpų išskirtų mezenchiminių stromos ląstelių (MSC) modelis, dažnai naudojamas tirti stromos ląstelių pagalbinį vaidmenį kraujodaros procesuose ir vėžio vystymosi metu. Iš pradžių izoliuotos ir imortalizuotos naudojant žmogaus papilomos viruso E6 ir E7 genus, HS-5 ląstelės pasižymi fibroblastams būdinga morfologija ir yra žinomos dėl to, kad išskiria platų spektrą citokinų ir augimo veiksnių, kurie yra labai svarbūs kraujodaros ir imuninių ląstelių sąveikai. Tarp svarbiausių išskiriamų veiksnių yra granuliocitų kolonijas stimuliuojantis faktorius (G-CSF), granuliocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (GM-CSF), makrofagų CSF (M-CSF), kamieninių ląstelių faktorius (SCF), interleukinas-6 (IL-6), IL-8 ir IL-11 bei kiti. Šios išskiriamos medžiagos leidžia HS-5 ląstelėms palaikyti kraujodaros pirmtakų ląstelių augimą ir proliferaciją in vitro, net ir be serumo sąlygomis, o tai pabrėžia jų funkcinį panašumą į pirmines MSC, remiančias kraujodarą.

Onkologijos tyrimuose HS-5 ląstelės naudojamos kaip modelis, leidžiantis tirti MSC ir vėžio ląstelių sąveiką, ypač nagrinėjant naviko mikroaplinkos įtaką vėžio ląstelių išlikimui, imuninės sistemos moduliavimui ir atsparumui vaistams. Tyrimai parodė, kad HS-5 ląstelės gali apsaugoti ūminės mieloidinės leukemijos (AML) ląsteles nuo apoptozės, kurią sukelia chemoterapiniai vaistai, tokie kaip citarabinas (Ara-C) ir daunomicinas (DNR), galbūt per mechanizmus, susijusius su citokinų signalizacija ir tiesioginėmis ląstelių tarpusavio sąveikomis. Šis HS-5 ląstelių apsauginis poveikis skatina AML ląstelių proliferaciją ir mažina chemoterapijos veiksmingumą, todėl ši ląstelių linija yra vertinga priemonė vaistų atsparumo modeliavimui kaulų čiulpų mikroaplinkoje. Be to, HS-5 ląstelės ekspresuoja MSC žymeklius, tokius kaip CD73, CD90 ir CD105, nors jų ekspresijos lygiai gali skirtis, palyginti su pirminėmis MSC.

Be to, HS-5 ląstelės buvo naudojamos naujiems terapiniams metodams tirti, pavyzdžiui, grynų nanomedžiagų, tokių kaip grafenas, citotoksiniam poveikiui įvertinti. Įrodyta, kad grafeno poveikis HS-5 ląstelėms sukelia mitochondrijų disfunkciją ir oksidacinį stresą, o tai veda prie apoptozės dėl padidėjusios reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) gamybos ir sutrikusio mitochondrijų membranos potencialo; taigi jos tarnauja kaip modelis, leidžiantis įvertinti nanodalelių toksiškumą ir terapinį potencialą sąveikaujant su stromos ląstelėmis naviko mikroaplinkoje.

Audinys
Kaulų čiulpai, stromos
Liga
Normalus
Sinonimai
  • HS5

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This human bone-marrow stromal cell line (HS-5) contains retroviral constructs encoding HPV-16 E6 and E7 oncogenes, supporting immortalization and transformation. The inserts are stably present in HS-5 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
HS-5 (Cytion katalogo numeris 305451)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_3720

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Ekspresuojami genai: granulocitų kolonijas stimuliuojantis faktorius (G-CSF); granulocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (GM-CSF); makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (M-CSF); Kit ligando (KL); makrofagų slopinančio baltymo-1 alfa; interleukino-1 alfa (IL-1 alfa); IL-1 beta; IL-1RA; IL-6; IL-8; IL-11; leukemijos slopinančio faktoriaus (LIF)
Virusai
Transformantas: 16 tipo žmogaus papilomos virusas (HPV16).

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
30 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių