HS-5

Buněčná linie HS-5 je model mezenchymálních stromálních buněk (MSC) odvozených z lidské kostní dřeně, který se běžně používá ke studiu podpůrné role stromálních buněk při hematopoéze a vývoji rakoviny. Buňky HS-5, původně izolované a imortalizované pomocí genů E6 a E7 lidského papilomaviru, vykazují morfologii podobnou fibroblastům a jsou známé tím, že vylučují širokou škálu cytokinů a růstových faktorů, které jsou klíčové pro interakce mezi hematopoetickými a imunitními buňkami. Mezi významné sekretované faktory patří faktor stimulující kolonie granulocytů (G-CSF), faktor stimulující kolonie granulocytů a makrofágů (GM-CSF), makrofágový CSF (M-CSF), faktor kmenových buněk (SCF), interleukin-6 (IL-6), IL-8 a IL-11. Tyto sekrece umožňují buňkám HS-5 udržovat růst a proliferaci hematopoetických progenitorových buněk in vitro, a to i v bezsérových podmínkách, což zdůrazňuje jejich funkční podobnost s primárními MSC při podpoře hematopoézy.

V onkologickém výzkumu slouží buňky HS-5 jako model pro zkoumání interakcí mezi MSC a nádorovými buňkami, zejména při studiu přežití nádorových buněk zprostředkovaného mikroprostředím nádoru, imunitní modulace a lékové rezistence. Studie prokázaly, že buňky HS-5 mohou chránit buňky akutní myeloidní leukémie (AML) před apoptózou vyvolanou chemoterapeutickými látkami, jako jsou cytarabin (Ara-C) a daunomycin (DNR), potenciálně prostřednictvím mechanismů zahrnujících cytokinovou signalizaci a přímé interakce mezi buňkami. Tento ochranný účinek buněk HS-5 zvyšuje proliferaci buněk AML a snižuje účinnost chemoterapie, což z této buněčné linie činí cenný nástroj pro modelování rezistence vůči léčivům v mikroprostředí kostní dřeně. Kromě toho buňky HS-5 exprimují markery MSC, jako jsou CD73, CD90 a CD105, ačkoli jejich expresní úrovně se mohou lišit ve srovnání s primárními MSC.

Kromě toho byly buňky HS-5 použity k prozkoumání nových terapeutických přístupů, jako je testování cytotoxických účinků nanomateriálů, například čistého grafenu. Bylo prokázáno, že expozice grafenu v buňkách HS-5 indukuje mitochondriální dysfunkci a oxidační stres, což vede k apoptóze prostřednictvím zvýšené produkce reaktivních forem kyslíku (ROS) a narušení mitochondriálního membránového potenciálu, čímž slouží jako model pro hodnocení toxicity nanočástic a terapeutického potenciálu při interakcích stromálních buněk v mikroprostředí nádoru.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení