HS-5

HS-5-cellelinjen er en modell av mesenkymale stromaceller (MSC) avledet fra menneskelig benmarg, som ofte brukes til å studere stromacellenes støttende rolle i bloddannelsen og kreftutviklingen. HS-5-cellene, som opprinnelig ble isolert og gjort immortalisert ved hjelp av E6- og E7-genene fra humant papillomavirus, har en fibroblastlignende morfologi og er kjent for å utskille et bredt spekter av cytokiner og vekstfaktorer som er avgjørende for interaksjoner mellom hematopoietiske celler og immunceller. Blant de viktigste utskilte faktorene er granulocyttkolonistimulerende faktor (G-CSF), granulocytt-makrofagkolonistimulerende faktor (GM-CSF), makrofag-CSF (M-CSF), stamcellefaktor (SCF), interleukin-6 (IL-6), IL-8 og IL-11, blant andre. Disse sekresjonene gjør det mulig for HS-5-celler å opprettholde veksten og proliferasjonen av hematopoietiske stamceller in vitro, selv under serumfrie forhold, noe som understreker deres funksjonelle likhet med primære MSC-er når det gjelder støtte til hematopoiesen.

I kreftforskning fungerer HS-5-celler som en modell for å undersøke interaksjonene mellom MSC-er og kreftceller, særlig når det gjelder å studere kreftcellers overlevelse, immunmodulering og legemiddelresistens formidlet av tumormikromiljøet. Studier har vist at HS-5-celler kan beskytte celler fra akutt myeloid leukemi (AML) mot apoptose indusert av kjemoterapeutiske midler som cytarabin (Ara-C) og daunomycin (DNR), potensielt gjennom mekanismer som involverer cytokinsignalering og direkte celle-til-celle-interaksjoner. Denne beskyttende effekten av HS-5-celler fremmer AML-celleproliferasjon og reduserer kjemoterapiens effekt, noe som gjør denne cellelinjen til et verdifullt verktøy for modellering av medikamentresistens i benmargens mikromiljø. I tillegg uttrykker HS-5-celler MSC-markører som CD73, CD90 og CD105, selv om uttrykksnivåene kan variere sammenlignet med primære MSC-er.

Videre har HS-5-celler blitt brukt til å utforske nye terapeutiske tilnærminger, for eksempel ved å teste de cytotoksiske effektene av nanomaterialer som ubehandlet grafen. Det har vist seg at eksponering for grafen i HS-5-celler induserer mitokondriell dysfunksjon og oksidativt stress, noe som fører til apoptose via økt produksjon av reaktive oksygenarter (ROS) og forstyrret mitokondriell membranpotensial, og dermed fungerer som en modell for å evaluere nanopartikkeltoksisitet og terapeutisk potensial i interaksjoner mellom stromaceller i tumormikromiljøet.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring