Mine otse sisu juurde
HS-5
Kude
Luuüdi, strooma
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
HS5

Dokumendid

HS-5

Cell line · Toote number 305451

The HS-5 cell line is a human bone marrow-derived mesenchymal stromal cell (MSC) model commonly used to study the supportive role of stromal cells in hema...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HS-5 rakuliin on inimese luuüdist pärinev mesenküümne stromaalrakkude (MSC) mudel, mida kasutatakse laialdaselt stromaalrakkude toetava rolli uurimiseks vereloomes ja vähi arengus. HS-5-rakud, mis algselt isoleeriti ja muudeti surematuks inimese papilloomiviiruse geenide E6 ja E7 abil, on morfoloogiliselt sarnased fibroblastidega ning neid iseloomustab mitmesuguste tsütokiinide ja kasvufaktorite eritumine, mis on olulised vereloome- ja immuunrakkude vastastikmõju seisukohalt. Tähtsamate sekreteeritud faktorite hulka kuuluvad muu hulgas granülotsüütide kolooniat stimuleeriv faktor (G-CSF), granülotsüütide-makrofaagide kolooniat stimuleeriv faktor (GM-CSF), makrofaagide CSF (M-CSF), tüvirakkude faktor (SCF), interleukiin-6 (IL-6), IL-8 ja IL-11. Need sekreteeritud faktorid võimaldavad HS-5-rakkudel toetada vereloome eellaste kasvu ja proliferatsiooni in vitro isegi seerumivabades tingimustes, mis rõhutab nende funktsionaalset sarnasust primaarsete mesenhümaalrakkudega vereloome toetamisel.

Onkoloogilistes uuringutes toimivad HS-5-rakud mudelina mesenhümaalrakkude ja vähirakkude vaheliste vastasmõjude uurimiseks, eriti kasvajamikrokeskkonna vahendatud vähirakkude ellujäämise, immuunmodulatsiooni ja ravimresistentsuse uurimisel. Uuringud on näidanud, et HS-5-rakud suudavad kaitsta ägeda müeloidse leukeemia (AML) rakke apoptoosi eest, mida indutseerivad sellised kemoteraapiavahendid nagu tsütarabiin (Ara-C) ja daunomütsiin (DNR), tõenäoliselt tsütokiinide signaalimise ja otseste rakkudevaheliste interaktsioonide kaudu. HS-5-rakkude selline kaitsv toime soodustab AML-rakkude proliferatsiooni ja vähendab kemoteraapia efektiivsust, muutes selle rakuliini väärtuslikuks vahendiks ravimresistentsuse modelleerimiseks luuüdi mikrokeskkonnas. Lisaks ekspresseerivad HS-5-rakud MSC-markereid, nagu CD73, CD90 ja CD105, kuigi nende ekspressioonitasemed võivad esmaste MSC-dega võrreldes erineda.

Lisaks on HS-5-rakke kasutatud uute ravivõimaluste uurimiseks, näiteks puhta grafeeni taoliste nanomaterjalide tsütotoksilise toime testimiseks. On näidatud, et grafeeniga kokkupuude HS-5 rakkudes põhjustab mitokondrite funktsioonihäireid ja oksüdatiivset stressi, mis viib apoptoosini reaktiivsete hapnikuühendite (ROS) tootmise suurenemise ja mitokondri membraanipotentsiaali häirete kaudu, toimides seeläbi mudelina nanomaterjalide toksilisuse ja terapeutilise potentsiaali hindamiseks stroomaalrakkude interaktsioonides kasvaja mikrokeskkonnas.

Kude
Luuüdi, strooma
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
  • HS5

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human bone-marrow stromal cell line (HS-5) contains retroviral constructs encoding HPV-16 E6 and E7 oncogenes, supporting immortalization and transformation. The inserts are stably present in HS-5 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
HS-5 (Cytioni katalooginumber 305451)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3720

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Ekspresseeritud geenid: granülotsüütide kolooniat stimuleeriv faktor (G-CSF); granülotsüütide-makrofaagide kolooniat stimuleeriv faktor (GM-CSF); makrofaagide kolooniat stimuleeriv faktor (M-CSF); Kit-ligand (KL); makrofaagide inhibeeriv valk-1 alfa; interleukiin-1 alfa (IL-1alfa); IL-1beeta; IL-1RA; IL-6; IL-8; IL-11; leukeemia inhibeeriv faktor (LIF)
Viirused
Transformant: inimese papilloomiviirus tüüp 16 (HPV16).

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
30 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia