İçeriğe atla
HS-5
Doku
Kemik iliği, stroma
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
HS5

HS-5

Cell line · Ürün numarası 305451

The HS-5 cell line is a human bone marrow-derived mesenchymal stromal cell (MSC) model commonly used to study the supportive role of stromal cells in hema...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

HS-5 hücre hattı, hematopoez ve kanser gelişiminde stromal hücrelerin destekleyici rolünü incelemek için yaygın olarak kullanılan, insan kemik iliğinden elde edilmiş bir mezenkimal stromal hücre (MSC) modelidir. Başlangıçta E6 ve E7 insan papillomavirüs genleri aracılığıyla izole edilen ve ölümsüzleştirilen HS-5 hücreleri, fibroblast benzeri bir morfoloji sergiler ve hematopoietik ve immün hücre etkileşimleri için hayati önem taşıyan çok çeşitli sitokinler ve büyüme faktörlerini salgılamalarıyla bilinir. Önemli salgılanan faktörler arasında granülosit koloni uyarıcı faktör (G-CSF), granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktör (GM-CSF), makrofaj-CSF (M-CSF), kök hücre faktörü (SCF), interlökin-6 (IL-6), IL-8 ve IL-11 gibi faktörler yer almaktadır. Bu salgılar, HS-5 hücrelerinin serum içermeyen koşullar altında bile in vitro olarak hematopoietik progenitör hücrelerin büyümesini ve çoğalmasını sürdürmesini sağlar; bu da hematopoez desteğinde birincil MSC’lerle işlevsel benzerliklerini vurgular.

Onkoloji araştırmalarında HS-5 hücreleri, özellikle tümör mikroçevresinin aracılık ettiği kanser hücresi hayatta kalması, bağışıklık modülasyonu ve ilaç direncinin incelenmesinde, MSC’ler ile kanser hücreleri arasındaki etkileşimleri araştırmak için bir model görevi görür. Çalışmalar, HS-5 hücrelerinin, muhtemelen sitokin sinyalleşmesi ve doğrudan hücre-hücre etkileşimlerini içeren mekanizmalar yoluyla, sitarabin (Ara-C) ve daunomisin (DNR) gibi kemoterapötik ajanların neden olduğu apoptozdan akut miyeloid lösemi (AML) hücrelerini koruyabildiğini göstermiştir. HS-5 hücrelerinin bu koruyucu etkisi, AML hücrelerinin çoğalmasını artırır ve kemoterapinin etkinliğini azaltır; bu da bu hücre hattını kemik iliği mikroçevresinde ilaç direncini modellemek için değerli bir araç haline getirir. Ayrıca, HS-5 hücreleri CD73, CD90 ve CD105 gibi MSC belirteçlerini eksprese eder; ancak bu belirteçlerin ekspresyon düzeyleri, birincil MSC’lere kıyasla farklılık gösterebilir.

Dahası, HS-5 hücreleri, saf grafen gibi nanomalzemelerin sitotoksik etkilerinin test edilmesi gibi yeni terapötik yaklaşımları araştırmak için kullanılmıştır. HS-5 hücrelerinde grafen maruziyetinin, mitokondriyal disfonksiyonu ve oksidatif stresi tetiklediği, bu durumun da artan reaktif oksijen türleri (ROS) üretimi ve bozulmuş mitokondriyal membran potansiyeli yoluyla apoptoza yol açtığı gösterilmiştir; dolayısıyla bu hücreler, tümör mikroçevresindeki stromal hücre etkileşimlerinde nanopartikül toksisitesini ve terapötik potansiyeli değerlendirmek için bir model görevi görmektedir.

Doku
Kemik iliği, stroma
Hastalık
Normal
Eş anlamlılar
  • HS5

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human bone-marrow stromal cell line (HS-5) contains retroviral constructs encoding HPV-16 E6 and E7 oncogenes, supporting immortalization and transformation. The inserts are stably present in HS-5 cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Hücre türü
Fibroblast

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HS-5 (Cytion katalog numarası 305451)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_3720

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Eksprese edilen genler: granülosit koloni uyarıcı faktör (G-CSF); granülosit-makrofaj koloni uyarıcı faktör (GM-CSF); makrofaj koloni uyarıcı faktör (M-CSF); Kit ligandı (KL); makrofaj inhibe edici protein-1 alfa; interlökin-1 alfa (IL-1alfa); IL-1beta; IL-1RA; IL-6; IL-8; IL-11; lösemi inhibe edici faktör (LIF)
Virüsler
Transformant: İnsan papilloma virüsü tip 16 (HPV16).

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
30 yıl
Etnik köken
Kafkas